北京酵母质粒小量提取试剂盒多少钱

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京酵母质粒小量提取试剂盒多少钱，产品信息：

类别：DNA纯化

英文名：Yeast high purity plasmid small amount rapid extraction kit

产品名	产品编号	包装规格
酵母质粒小量提取试剂盒	ALH082	50次

本试剂盒适用于酵母小规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合lyticase特异消化酵母细胞壁，能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除细胞壁后,然后碱裂法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除， 最后低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(50次)：

RNaseA(10mg/ml)—————————150μl

Lyticase————————————2500U

溶液YP1—————————————15ml

溶液YP2—————————————15ml

溶液YP3—————————————20ml

去蛋白液PD———————————25ml

漂洗液WB————————————15ml

洗脱缓冲液EB——————————15ml

吸附柱和收集管(2ml)———————50套

试剂盒特点：

1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项

1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2. 溶液YP3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

3. 通常酵母质粒拷贝数都很低，高拷贝质粒最大得率一般为每5 ml 培养物提取1μg左右的质粒。用于下游试验时通常建议使用量为：1-5μl用做PCR 模板;5-10μl 用于转化大肠杆菌,选择高效率的感受态细胞。

4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成， 与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。

5. 用户需要自备Sorbitol buffer( 1M 山梨醇， 0.1M Na2EDTA，14 mMβ-巯基乙醇)。配制方法：在600 ml 去离子水里面溶解182.2 克山梨醇，加入200 ml 0.5 M Na2EDTA (pH 8.0) ，不需要调节PH 值，定容到1L，4℃保存。临用前加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。

6. 菌体浓度检测一般OD600值为1的时候,酿酒酵母细胞是1-2×10^7cells/ml，由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD值变化也很大，以上仅供参考。

7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。

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北京酵母质粒小量提取试剂盒多少钱专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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酵母质粒小量提取试剂盒

酵母质粒小量提取试剂盒等试剂产品的使用注意事项：

（1）、所有试剂、溶液以及样品的包装上必须要有标签。标签要完整、清晰，表明试剂的名称、规格、质量。

（2）、溶液除了表明品名外，还应表明浓度、配置日期等。万一标签脱落，应照原样贴牢。决定不允许在容器内装入与标签不相符的物品。

（3）、无标签的试剂必须取小样检定后才可使用。不能使用的化学试剂要慎重处理，不能随意乱倒。为了保证试剂不受污染，应当用清洁的牛角勺或不锈钢小勺从试剂瓶中取出试剂，绝不可以用手抓取。若试剂结块，可用洁净的玻璃棒或瓷药铲将其捣碎后取出。

（4）液体试剂可用洗干净的量筒到取，不要用吸管伸入原试剂中吸取液体。从试剂瓶中取出的、没有用完的声誉药品，不可再倒回原瓶。

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