- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL016
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
冷藏
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
50T/200T
全血基因组DNA提取试剂盒
规格：50T/200T编号：KL016
原理简介
本试剂盒适用于各种动物抗凝全血样本，用于从中提取基因组DNA。独特的裂解缓冲液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物质，并利用玻璃奶吸附DNA，进一步的去掉其他杂质，提取出来，得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR，sequencing，Southern blot，mutant analysis，SNP 等下游应用实验。
注意事项
1．裂解液低温时可能出现析出和沉淀，可以在热水中温浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2．避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3．RNaseA经常使用可放2－8度保存，蛋白酶K请放－20度保存。
4．同一样本，如果想大量提取，可以增加样本量，并且每一步试剂加量，但使用次数会成倍减少。
操作步骤
在合适的容器中，用双蒸水将红细胞裂解液（10×）稀释成1×。即10ml溶液中加入90ml双蒸水混匀。
1．取不超过500ul抗凝血，加入三倍体积的稀释过的红细胞裂解液，混匀。放置2分钟，12000rpm离心1分钟。去上清。再加入2倍体积的红细胞裂解液，用移液器轻轻吹打沉淀，充分混匀，离心，弃上清，沉淀为白细胞。如果血液为家擒类动物，因为红细胞有核，所以可以省去此步，但加入的样品量不要超过50ul,直接进入下一步。
2．加入250ul裂解液，加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液，振荡混匀，室温放置5-10分钟。
3．加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液，颠倒混匀，65℃放置10－30分钟，期间颠倒3－5次，小心内心管盖受热开启。如30分钟沉淀无法完全消失，请注意第6步处理。
4，在上清中加入三倍体积无水乙醇，充分混匀。
5．12000rpm离心5分钟，吸去上清，核酸在沉淀中。
6．沉淀中加入500ul结合液，65℃水浴1-2分钟，核酸沉淀可溶解（如无法完全溶解，可转移上清到一新的离心管中，弃沉淀）。
6．玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶，混匀，室温放置2分钟，10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
7．室温放置10分钟（如果玻璃奶加量，请适当延长放置时间，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入50－100ul TE缓冲液混匀溶解，65℃水浴5分钟。离心，取上清为所提基因组。
8．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。
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文献和实验血液/组织/细胞基因组DNA提取试剂盒操作指南（DP304）——抗凝全血
以下操作按照天根产品 DP304 血液/组织/细胞基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。一、实验准备：1.抗凝血 300 μl~1ml 抗凝全血2.自备试剂：无水乙醇 ；红细胞裂解液（目录号：RT122）；3.移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml）； 1.5 ml 离心管4.涡旋振荡器 金属浴/水浴 台式离心机备注：本实验以人血为例，如提取哺乳动物全血
血液基因组 DNA提取试剂盒操作指南（DP349） ——中量全血操作流程（1-10 ml血样）
以下操作按照天根产品 DP349 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 抗凝或新鲜全血(本实验以10 ml人的新鲜全血（a）/抗凝血（b）分别为例 )2. 移液器及配套无菌枪头（2.5 μl，10 μl ，200 μl ，1ml），15 ml离心管3. 无水乙醇，70%乙醇，干净的吸水纸4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机本文版权归天根生化科技（北京）有限
血液基因组 DNA提取试剂盒操作指南（DP348） ——200μl~1ml 抗凝全血
以下操作按照天根产品 DP348 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 抗凝血 200 μl~1ml抗凝全血2. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml）3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机备注：本实验以人血为例，如提取哺乳动物全血可以用此流程，如果禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，红细胞有核细胞，因此处理量为5-20 μl，当处理
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