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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Apoptosis detection kit (Annexin V-FITC probe)
- 库存:
671
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
25次|50次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京凋亡细胞检测试剂盒多少钱,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京凋亡细胞检测试剂盒多少钱
英文名:Apoptosis detection kit (Annexin V-FITC probe)
产地:国产|进口
编号:ALH608
品牌:百奥莱博
本试剂盒以标记了FITC的Annexin Ⅴ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。
Propidium iodide(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。将Annexin Ⅴ与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。
试剂盒组份:
Annexin V-FITC(20ug/ml)————————500ul
Binding Buffer—————————————20ml
Propidium Iodide(PI)(50ug/ml)—————125ul
注意事项
1. 为保证得到理想的实验结果,在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项;
2. 试剂(尤其是小瓶装的试剂)在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落;
3. Propidium iodide(PI)能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用;
4. 此试剂盒仅供科研使用,不宜用于临床诊断;
5. 本试剂盒中提供的PBS 为随试剂赠送,并非试剂盒的真正组成成分;细胞的洗涤同常规方法。
储存条件:2~8℃,有效期12个月。
本品别名:细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)|凋亡细胞检测试剂盒
我公司的北京凋亡细胞检测试剂盒多少钱,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
·T Simple 载体连接试剂盒(不含多克隆位点)
编号:ALH347
英文名称:T Simple vector ligation Kit
规格:20次|60次
本试剂盒T Simple Vector是一种高效克隆PCR产物 (TA Cloning) 的专用载体。这种载体是由pBlueScript II SK(+)质粒改建而成,和传统T载体ECOR V切开后加T方法不同,T Simple载体通过改造pBlueScript II SK(+),在原pBlueScript II SK(+)多克隆位点引入 Xcm I酶切后使其原多克隆位点两侧的3’末端直接产生未配对的T碱基,因此有更高的重组效率。同时它消除了pBlueScript II SK(+)载体上的多克隆酶切位点,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时,酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响,可以大大提高酶切效率,增加亚克隆成功率。此外,本公司载体连接体系还有背景低(蓝斑小于10%),重组率高(白斑中超过90%有插入片段),可快速连接等特点。本说明书末列出了T Simple 载体相关的技术资料,其全序列可参照pBlueScript II SK(+)序列,只是其多克隆酶切位点处序列稍有不同。
试剂盒组份:
T Simple Vector(30ng/μl)———————20μl
1000bp Control(30ng/μl)-——————5μl
10×PEG Enhancer-———————————50μl
10×Ligation Buffer-—————————40μl
2×Quick Ligation Buffer-———————100μl
T4 DNA ligase(5Uμl)—————————20μl
储存条件:-20℃。
北京凋亡细胞检测试剂盒多少钱关键词:凋亡细胞检测试剂盒,细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)
BL1095 DMEM(H)
BL0891 兔抗HRP免疫血清 0.5ml
ARB13510 鱼促肾上腺皮质激素(ACTH)Elisa定量检测 Fish acth ELISA KIT
BTN131075 糖蛋白染色试剂盒 Staining Kit for Glycoprotein
F040102 鸡卵清蛋白偶联克伦特罗 OVA-CLE
ARB12611 大鼠羟脯氨酸(Hyp)含量检测 Rat hydroxyproline,hyp ELISA KIT
ARB12451 大鼠钩端螺旋体IgG(Lep IgG)ELISA检测服务 Rat leptospira igg,lep igG ELISA KIT
J0313 兔抗人IgM(H+L)抗血清 1ml/10ml
ARB13740 兔粒细胞集落刺激因子(G-CSF)检测服务 Rabbit granulocyte colony stimulating factor,g-csf ELISA KIT
PY04-043 吖啶黄素(VI) 2.5mg/支×10支 加入100ml Fraser/Half Fraser肉汤基础中制成Fraser肉汤,用于李斯特氏菌的选择性增菌培养
ARB11620 人羟赖氨酸(Hyl)elisa检测 Human hydroxylysine,hyl ELISA KIT
ARB13328 马生长激素(GH)酶联免疫定量检测 Equine growth hormone,gh ELISA KIT
ARB13984 猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)酶免分析 Porcine matrix metalloproteinase 9,mmp-9 ELISA KIT
ARB13889 猪孕激素/孕酮(PROG)定量分析 Porcine progesterone,prog ELISA KIT
ARB10069 人C4结合蛋白(C4BP)酶标法分析 Human c4 binding protein,c4bp ELISA KIT
ARB13410 鸡1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)含量分析 Chicken 1,3-βd glucosidase,1,3-βd-glu ELISA KIT
ARB14148 犬转化生长因子β1(TGF-β1)Elisa定量检测
3671-99-6 葡萄糖-6-磷酸二钠 D-Glucose6-phosphate
62669-70-9 Rhodamine 123 罗丹明123
PY02-198A 甘露醇发酵培养基 250克
蒽醌 Puromycin dihydrochloride 84-65-1
呋喃它酮 Avidin(chiken egg white) 139-91-3
北京凋亡细胞检测试剂盒多少钱关键词:凋亡细胞检测试剂盒,细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)
·DNA/RNA/miRNA分离提取试剂盒
编号:ALH069
英文名称:Tissue Cells DNA/RNA/microRNA Extraction & Isolation Kit
规格:50次
本试剂盒适用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和包括miRNA的RNA(如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液,还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取,富集miRNA。)。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶,然后裂解混合物RNA/miRNA/ DNA同时通过一个基因组DNA吸附柱,基因组DNA被吸附而miRNA/RNA穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的miRNA/RNA用乙醇调节结合条件后,miRNA/RNA在高离序盐状态下选择性吸附于miRNA/RNA吸附柱上, 再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯净的miRNA/RNA。无苯酚、氯*(代"仿")DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的miRNA/RNA/基因组DNA纯度高,互不干扰。得到的miRNA/RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。
产品特点:
1. 完全不使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2. 快速,简捷,单个样品miRNA/RNA/基因组DNA分离操作一般可在40分钟内完成。
3. 独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留,一般情况下得到的miRNA/RNA不需要DNase消化可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4. 多次柱漂洗确保miRNA/RNA/基因组DNA高纯度,可直接用于下游各种实验。
产品组分:
裂解液RLT Plus————50ml
Wash Solution 1————12ml
Wash Solution 2/3————10ml
RNase-free H2O—————10ml
抑制物去除液——————25ml
漂洗液—————————15ml
洗脱缓冲液———————10ml
基因组DNA吸附柱和收集管————50套
RNA吸附柱和收集管————50套
储存条件:室温,有效期12个月。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺脾脏DNA含量丰富,超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如细胞不超过3-4x106,组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液RLT Plus 、抑制物去除液IR、Wash solution 1、Wash solution 2/3中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 该试剂盒如需要用于植物样品尤其是多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/miRNA/RNA提取,请咨询技术人员,可能需要用到其它试剂。
5. 如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液,还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取,富集miRNA。请咨询我们。
6. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留( DNase 消化也无法做到100% 无残留), 本试剂盒,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 分离清除技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
操作步骤:
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:
第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶、漂洗液WB 和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇!
1. 组织培养细胞
a. 收集<107 悬浮细胞到一个1.5ml 离心管,对于贴壁细胞,孔板培养可以直接裂解,细胞瓶培养应该先用胰蛋白酶消化后吹打下来收集。
b. 13000rpm 离心10 秒(或者300xg 离心5 分钟),使细胞沉淀下来。完全吸弃上清,留下细胞团,注意不完全弃上清会稀释裂解液导致产量纯度降低。
c. 轻弹管壁将细胞沉淀完全松散重悬, 加350μl( <5×10^6细胞) 或600μl(5x106-1×10^7细胞)裂解液RLT Plus,吹打混匀后用手剧烈振荡20 秒充分裂解。
d. 匀浆:(处理细胞量极少时<1×10^5一般不需要,涡旋振荡一分钟匀浆)。用带钝针头的一次性1 ml(配0.9mm 针头) 注射器抽打裂解物5-10 次或直到得到满
意匀浆结果(或者电动匀浆30 秒) ,可以剪切DNA,降低粘稠度防堵塞柱子和提高产量。
e. 将裂解混合物或匀浆混合物全部加到DNA 吸附柱上(吸附柱放在收集管内)。
f. 接操作步骤项下3。
2. 动物组织(例如鼠肝脑)
a. 电动匀浆:新鲜组织用解剖刀迅速切成小碎块,加入350μl(<20mg 组织)或者600μl(20-30mg 组织)的裂解液RLT Plus 后电动彻底匀浆20-40 秒。
b. 液氮研磨+匀浆:在液氮中研磨组织成细粉后,取适量组织细粉(20mg/30mg)转入装有350μl/600μl 组织裂解液RLT Plus 的1.5ml 离心管中, 用手剧烈振荡20秒,充分裂解。用带钝针头的一次性1 ml(配0.9mm 针头) 注射器抽打裂解物10次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30 秒) ,可以剪切DNA,降低粘稠度防堵塞柱子和提高产量。
c. 将匀浆后裂解物13,000rpm 离心3 分钟,沉淀可能存在的裂解困难的碎片或者不溶物,将裂解物上清全部加到DNA 吸附柱上(吸附柱放在收集管内)。
d. 接操作步骤项下3。
3. 13000rpm 离心30 秒,保留滤过液(miRNA/RNA 在滤过液中)。DNA 吸附柱子(膜上吸附有基因组DNA)短时间可存放4℃度备用。确保离心后液体全部滤过去,膜上没有残留,如有必要,可以加大离心力和离心时间。
以下步骤为提取RNA 步骤:
4. 用微量移液器较精确估计滤过液体积(350μl 或者600μl 左右,滤过时候损失体积应该减去),加入1.25 倍体积的无水乙醇,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
5. 立刻将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个RNA 吸附柱 中,(吸附柱放入收集管中)13000rpm 离心30 秒,弃掉废液。装滤过液体和乙醇混合物的DNA 吸附柱的收集管(混合物转入RNA 吸附柱后剩下的空收集管)需要保留,将DNA 吸附柱放回此收集管保留在4℃,备用于步骤11 开始的基因组DNA提取。
6. 加700μl Wash Solution 1(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
7. 加入500μl Wash Solution 2/3(请先检查是否已加入无水乙醇!),12000rpm 离心30 秒,弃掉废液。加入500μl Wash Solution 2/3,重复一遍。
8. 将吸附柱 放回空收集管中,13000rpm 离心2 分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
9. 取出吸附柱,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟。
10. 如得到的RNA 可以立即用于下游反应或者尽快置于低温保存。
以下步骤为提取DNA 步骤:
11. 在步骤3 的DNA 吸附柱上加入500μl 抑制物去除液IR,12,000rpm 离心30 秒,弃废液。
12. 加入700μl 漂洗液WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30 秒,弃掉废液。
13. 加入500μl 漂洗液WB,12,000rpm 离心30 秒,弃掉废液。
14. 将DNA 吸附柱放回空收集管中,13,000rpm 离心2 分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
15. 取出DNA 吸附柱,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加100μl 洗脱缓冲液EB (洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中预热效果更好), 室温放置3-5分钟,12,000rpm 离心1 分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,室温放置2 分钟,12,000rpm 离心1 分钟。洗脱体积越大,洗脱效率越高,如果需要DNA 浓度较高,可以适当减少洗脱体积, 但是最小体积不应少于50μl,体积过小降低DNA 洗脱效率,减少DNA 产量。
16. DNA 可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。
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文献和实验示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
:敏感度高,适合于检测少量样本,小部分凋亡细胞。如临床活组织检测。 Fasta921 zhaohu552211 wrote:感谢大家!我现在做的是大鼠的肝脏组织,不是细胞,在这种情况下我可以做AnnexV嘛?我知道AnnexV可以做细胞的,如果可以做组织的话,我定那家的试剂盒,具体要注意什么? 听说这个电泳很难掌握条件!再次感谢大家! 兄弟,貌似做AnnexinV国产很多不能做组织,呵呵!我没做过组织,没经验,提供点资料看看!美国ADL Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
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