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- 文献和实验
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1000
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合肥博美
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0.2ml
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文献和实验;如Boehringer Mannheim) 8. Beckman GH-3.7和Sorvall HS-4转子 9. 15ml和50ml聚丙烯锥底管 10. 填充棉花和未充填棉花的高压灭菌的9in(约23cm)巴氏吸管,直径60mm的组织培养皿(如Falcon) 实验方法: 1. 将胶原酶消化的脾脏细胞悬液于4℃,280g离心10min,弃上清。用高密度BSA迅速重悬沉淀物,每个脾脏约1ml。 2. 准备
SACC比较难消化,使用37度预热过的0.25%的胰酶一般消化5-8分钟即可,在看到细胞成片脱落后加入10%胎牛血清的培养液终止。 巴氏吸管吹打均匀,计数后传代。消化时一般不用EDTA,老板说对细胞损伤大,而且还要清洗几次,麻烦。只要消化下来,SACC很容易形成单细胞悬液。
细胞:猪肾细胞系(IBRS-2) 猪 国内来源: 猪生长类型:贴壁生长传代步骤:弃去旧的生长液-->用无钙镁水(CMF)冲洗贴壁细胞3次并到尽所有液体-->加入1ml无钙镁水,用巴氏吸管滴1-2滴2.5%的胰酶-->放入37度二氧化碳温箱中消化1-2-->弃去胰酶,加入20ml含10%小牛血清的MEM生长液,拍打吸吹下细胞-->镜下观察-->分2瓶-->作好记号,放入37度二氧化碳温箱生长。细胞特点:1、IBRS-2对胰酶很敏感,能在较短的时间内消化下来,消化时要注意;2、但该细胞容易
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