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- 2025年09月08日
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合肥博美
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文献和实验流式课堂 | 裂红 or 分离液？外周血不同制备方法应用场景
、粒细胞等），需要裂解红细胞；倘若检测的是红细胞，不需要裂解红细胞； ⊙ 如果后续样本不用于流式分析，而是需要培养或者冻存复苏，使用裂红后培养的细胞，活性可能会打折扣。 Ficoll 密度梯度离心法 01 原理 根据细胞的沉降系数差异，借助细胞分离液和离心操作，对细胞进行分离。 02 优点 ⊙ 获得的细胞更纯净，有利于细胞培养后检测胞内因子 ⊙ 可将细胞冻存后再复苏、培养、检测 ⊙ 去除死细胞 03 缺点 ⊙ 步骤复杂，需 30min 以上 ⊙ 取白膜层需要丰富的经验 ⊙ 只能获得淋巴细胞和单核细胞
Purpose Materials10ml 6% dextran + 7ml citrate/citric acidDextran: T500 --> 6g+100ml PBSCitrate solution: 25g Na Citrate + 8g citric acid + 500 ml PBS 43 ml blood 12 ml RT Histopaque 107718 ml cold H2 O2 ml 10x PBSM199 for HUVECs: 1L powder pocket
1.09-1.11 │淋巴细胞 1.052-1.077 粒细胞 │ B淋巴细胞 1.062-1.075 嗜酸性 1.09-1.095 │ T淋巴细胞 1.065-1.077 嗜中性 1.080-1.085 │ 淋巴母细胞 1.065-1.077 单核细胞
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