细胞冻存液（1640）

Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项

Healthcare Life Sciences #17 - 1440 - 02) RPMI 1640 培养基（Invitrogen） 胎牛血清（FBS）（GIBCO） 双抗 P/S（Penicillin/ Streptomycin) (GIBCO) 二甲亚砜（DMSO）（SIGMA） 预先装好异丙醇的冻存盒 2. 方法/步骤 配制所需的溶液： a. 细胞培养基：RPMI 1640 + 10% FBS+ 1% P/S； b. 细胞冻存液：FBS 中加入 10%DMSO； （1）在离心管中加入淋巴

杂交瘤细胞的保存与复苏

杂交瘤细胞的保存与复苏      目前冻存细胞均采用-196℃液氮保存，以保持其特性和活性。       1、杂交瘤细胞的冻存  收集培养的杂交瘤细胞或从小鼠体内取出的杂交瘤细胞，加入一定量的细胞冻存液(30～40％小牛血清，50～60％不完全RPMI-1640培养液，10％DMSO)，使细胞浓度为1～5×106 个/ml。将细胞悬液分装到1ml冻存管中，先置于-20℃冰箱1h，再移置-80℃冰箱，最后置液氮内，以5cm/5min速度下降，直至没

培养细胞的保存和复苏

pH至7.7，过滤除菌分装，然后-20℃保存备用。EDTA液配方（0.2% 1000ml）EDTA（versene） 2 gNaCl 8gKCl 0.2gNa2HPO4（12H2O） 2.9gKH2PO 40.2g以上药物同样充分溶解后，加新鲜的三蒸水至1000 ml，分装然后高压15磅30分钟灭菌，最后4℃保存备用。细胞冻存液：小牛血清90℅与二甲基亚砜（DMSO）10℅混合；-20℃冰箱保存备用。或小牛血清30℅，1640培养液60℅，DMSO10℅混合； - 20℃冰箱保存备用。