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文献和实验把10%亚硫酸钠溶液10毫升加200毫升蒸馏水,再加10毫升1NHCI,即成漂当液。 5固绿染色液 0.5克固绿溶于100毫升95%乙醇溶液。 五、实验步骤: 2.水解 先在恒温 水浴 箱中准备好恒温60℃的1NHCI。注意一定要控制好温度不能过高,高了醛基要破坏,低了小解不充分,醛基不能释放出来。水解的时间长短要根据材料,以及固定液的种类而定。根据试验结果,取一个适当时间。
的时候出问题了 细胞估计已经破裂 固定时候应该缓慢添加固定液 有的时候固定液就是用PBS和无水乙醇配置的。 Fasta921 我做的步骤:接种适当浓度细胞于培养皿中,培养过夜后,经0.25%胰蛋白酶消化,冷磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后离心,用70%(体积分数)预冷乙醇悬浮细胞于-20度固定过夜后,离心收集细胞,用PBS洗3次去除乙醇,细胞团重悬于PBS中,用20 μg/ml含RNaseA的碘化丙啶PI染色液避光染色30 min,经100目尼龙
将心脏剪一小口,取心脏血一滴滴在干净载玻片一端,推片,按此法制备二张血涂片,室温晾干。2. 将涂片作好标记放在70%乙醇中固定5分钟,室温晾干。3.放入5%三氯醋酸中60℃30分钟,抽提出核酸。4.清水冲洗多次(3分钟以上),以冲去痕迹的三氯醋酸。5.滤纸吸干玻片上水分。6. 一张片放入0.1%碱性固绿(pH8.0~8.5)中染色10~15分钟,另一张片放入0.1%酸性固绿(pH2.0~2.5)染色5~10分钟。7.清水冲洗,盖上盖片镜检。(三)结果经碱性固绿染色片中,胞质、核仁不着色,细胞核大部
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