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胰蛋白酶抑制剂(大豆)|CAS
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联硕生物
9035-81-8
1瓶
应用
胰蛋白酶用于研究评估一种碱性蛋白酶在动物细胞培养中的潜在应用,该蛋白酶来自弧菌Vibrio sp. V26的非产毒红树林分离株。 [1] 胰蛋白酶也用于研究改善嗜酸性粘蛋白中真菌的检测。 [2]
生化/生理作用
该抑制剂能够在较小程度上抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和纤溶酶。它还能抑制蛋白酶血浆激肽释放酶和凝血因子X,机制与抑制胰蛋白酶类似。胰蛋白酶抑制剂不会抑制金属蛋白酶、基于组织的激肽释放酶、酸性蛋白酶或硫代蛋白酶。该抑制剂通过与蛋白酶活性位点按1:1化学计量形成复合物,然后在抑制剂上切割单个精氨酸-异亮氨酸键。抑制作用是可逆的且具有pH依赖性。
组分
大豆胰蛋白酶抑制剂是一种单体蛋白,在两个二硫键交联的单个多肽链中含有181个氨基酸残基。
单位定义
一个胰蛋白酶单位是指在25°C、pH 7.6条件下,以N-α-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯(BAEE)为底物,每分钟产生0.001的 A253所需的酶量。在25℃、pH 7.6条件下,反应体积为3.2 ml、光程为1 cm时,以BAEE为底物,一单位胰蛋白酶每分钟可产生0.001的ΔA253 。
制备说明
胰蛋白酶抑制剂能够以10 mg/mL溶于水和磷酸盐缓冲液。它能够以1 mg/mL溶于平衡盐溶液和无血清培养基中。浓度大于10 mg/mL的浓缩液可能浑浊,呈黄色至琥珀色。使用胰蛋白酶消化细胞后,重悬于胰蛋白酶抑制剂溶液中,使得用于解离的胰蛋白酶溶液浓度达到1 mg/mL。然后将细胞悬浮液以1000rpm离心,得到细胞沉淀。
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