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文献和实验等电聚焦电泳与琼脂糖电泳过程中凝胶板的制备方法和简单操作 等电聚焦电泳 1.制备凝胶板 1)30%凝胶母液的制备 丙烯酰胺30克,N、N双甲叉丙烯酰胺0.8克,加蒸馏水至100毫升,溶解后过滤,贮存于有色瓶内. 2)准备制胶模具 准备玻璃板凉快,相应压条三根.同样大小的玻璃纸及聚碳酸脂薄膜各一张(也可不用).文具夹若干.上述用品洗净晾干后备用. 先将玻璃纸用蒸馏水浸透,平放在一块玻璃上,放三根压条于其上(这样就形成一个胶室),再放聚碳酸脂薄膜,最后放一张
槽盖,接通电源,6V/cm通电至前沿移动约35mm,时间约为1小时,利用示踪染料判断移动距离。 3. 扩散 将胶板移出电泳槽并放在水平位置上,用滤纸润干胶板凹槽中的缓冲溶液,在凹槽中加入适量的抗体(0.2ml~0.25ml),注意抗体不能溢出凹槽以避免污染。将胶板移至含有叠氮化钠且有一定湿度的盒内,加盖密封后在30℃水浴扩散至少10小时后,移至0.85%盐水中以终止扩散并洗去未结合的蛋白。 4. 实验结果 观察抗原和抗体之间所形成的沉淀线,并进行记录。
DYCZ一28A、28B、28C、28D、29、30型夹芯式垂直电泳槽
螺母,取出胶框,剥出玻璃板,在两块玻璃板下角空隙内,用刀片背面轻轻撬动,即可将胶面与一块玻璃板分开,将有胶板的玻璃板平放在桌上,双手轻轻沿凝胶底将胶片托起,放在大培养皿中染色,胶板经漂洗、脱色后即可看到清晰的分离条带。 注:DYCZ—28B、29型夹芯式电泳槽使用方法与此相同。DYCZ—28C型、28D型和30型电泳槽使用方法也与此相同,因是制作两块胶板,故实际形成三个贮液槽。请注意在操作时两个胶室的短玻璃板都要向里,中间为负极,两边为正极。 注意:可作两块胶的电泳槽,在作一块胶时,应将三头
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