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联硕生物
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文献和实验【实验操作步骤】 1 使用移液管(枪)吸取15ml淋巴细胞分离液注到50ml分离管下室(15ml分离管吸取4ml); 注意:请用移液管直接将淋巴细胞分离液通过隔板小孔注到分离管下室,勿将分离液置于分离管上室,否则分离液难以流至下室,影响后续分离操作。 2在50ml分离管中加入2-30ml稀释血液样品(15ml分离管倒入0.5-8ml); 注意: 1)请勿将稀释血液样品注入到隔板下室; 2)请将稀释血液从隔板上方缓缓加入,所加入的位置勿距离隔板太远,否则容易在管壁上残留血液样本。
细胞培养器材的选择:从大小来讲,细胞培养瓶约可分为约600ml,250ml,50ml和25ml的,一般都经过表面改性处理,适合细胞贴壁和生长。600ml 、300ml的多用于大规模培养时用(如单克隆细胞的培养等),50ml的多用于一般性细胞实验用(一般性的传代,保存细胞,为实验提供细胞等),25ml一般是用来复苏细胞或细胞较少时的培养,还有做原代细胞时也可以做多瓶而避免交叉污染。当然还有其他如圆形的等,都可根据个人爱好和实验需要自己选择。 根据细胞培养瓶制作材料的不同
液体。1536 孔球形微孔板建议采用自动液体进样。 * 在手动接种过程中,请确保移液管吸头不会刮伤孔的底部或侧面,以免损坏 Corning® 超低附着表面涂层。 **如果使用自动液体进样器,请增加稀释体积以考虑灌注仪器体积和管道的长度 (10 mL)。 将球形微孔板置于设置为 37 °C 和 5% CO2 的加湿培养箱中。 观察评估 0、24、48 和 72 小时时间点的球状体形成和生长,并进行细胞活力测定。如实验设计时间更长,每 3-4 天更换一半培养体积的新鲜 3dGRO™ 球状体培养
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