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- 中国
- 60908-3361
- 2025年07月11日
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低温运输，-20℃保存
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1年
- 英文名：
pFastBac-C-His-TEV
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大量
- 供应商：
信裕生物
质粒编号: 60908-3361
质粒名称: pFastBac-C-His-TEV
其他名称:
质粒大小（bp）:
抗性:
质粒类型: 昆虫细胞表达载体
是否病毒:
启动子:
稳转或瞬转:
组成型或诱导性:
表达水平:
蛋白标签:
测序引物:
GenBank号:
其他属性:
质粒图谱:
质粒序列:
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文献和实验strep-tag 对 Strep-Tactin XT的亲和力，大规模纯化 CB2 蛋白；然后通过 WB 检测 MBP-CB2 的表达情况，G 蛋白激活实验检测 CB2 的功能活性。 3、CB2 蛋白的纯化的策略：根据不同构建载体表达的情况及 Strep-Tactin 亲和力的测试，作者通过串联亲和层析对 CB2 蛋白进行纯化，分别使用 C 端 His10 和 N 端 twin-Strep-tag。首先使用 Ni-resin 进行第一步纯化后，再从含有 CB2 蛋白的粗提物进行透析，用 TEV 蛋白
蛋白的损失。 如何进行柱上酶切 柱上酶切纯化路线比较简单，只需上样后加入蛋白酶，在合适的温度下进行孵育一段时间，经过清洗便可得到纯度较高的无标签的目标蛋白。 去除标签的关键在于选择高效的蛋白酶并构建相应的氨基酸识别序列。下表展示的是几种常见的内切酶及对应酶切位点。 组氨酸标签由于分子量小通常不需要去除。如有必要，可使用 TEV 蛋白酶去除组氨酸标签。由于TEV酶带有六组氨酸标签，因此可实现柱上酶切而得到高纯度无标签的目标蛋白。 PreScission
人 1-118 44c a. Korf等和Kohl等的研究中包含了六组氨酸标签。 b. 可溶性蛋白量大于等于10%即认为该融合蛋白可溶。 c. 纯化后的融合蛋白如果在SDS-PAGE后考染在合适位置出现条带即认为可溶。 Korf等的还发现对于定位于真核细胞细胞器，质膜或者骨架的蛋白，相对于其它标签系统来讲，NusA标签是最好的可溶性表达
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