- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
pET-29c(+)
- 库存:
大量
- 供应商:
信裕生物
质粒编号:
质粒名称: pET-29c(+)
其他名称:
质粒大小(bp): 5372
抗性: Tet;Kan
质粒类型: 大肠杆菌表达载体
是否病毒:
启动子:
稳转或瞬转:
组成型或诱导性:
表达水平: 高
蛋白标签: N-S, N-Thrombin, C-His
5′ 测序引物:T7
5′ 测序引物序列: 5′-TAATACGACTCACTATAGGG-3′
GenBank号:
其他属性:
质粒图谱:
质粒序列:
| 1 | atccggatat | agttcctcct | ttcagcaaaa | aacccctcaa | gacccgttta | 50 |
| 51 | gaggccccaa | ggggttatgc | tagttattgc | tcagcggtgg | cagcagccaa | 100 |
| 101 | ctcagcttcc | tttcgggctt | tgttagcagc | cggatctcag | tggtggtggt | 150 |
| 151 | ggtggtgctc | gagtgcggcc | gcaagcttgt | cgacggagct | cgaattcgga | 200 |
| 201 | tccacagata | tcccatggaa | ccgcgtggca | ccagggtacc | cagatctggg | 250 |
| 251 | ctgtccatgt | gctggcgttc | gaatttagca | gcagcggttt | ctttcatatg | 300 |
| 301 | tatatctcct | tcttaaagtt | aaacaaaatt | atttctagag | gggaattgtt | 350 |
| 351 | atccgctcac | aattccccta | tagtgagtcg | tattaatttc | gcgggatcga | 400 |
| 401 | gatcgatctc | gatcctctac | gccggacgca | tcgtggccgg | catcaccggc | 450 |
| 451 | gccacaggtg | cggttgctgg | cgcctatatc | gccgacatca | ccgatgggga | 500 |
| 501 | agatcgggct | cgccacttcg | ggctcatgag | cgcttgtttc | ggcgtgggta | 550 |
| 551 | tggtggcagg | ccccgtggcc | gggggactgt | tgggcgccat | ctccttgcat | 600 |
| 601 | gcaccattcc | ttgcggcggc | ggtgctcaac | ggcctcaacc | tactactggg | 650 |
| 651 | ctgcttccta | atgcaggagt | cgcataaggg | agagcgtcga | gatcccggac | 700 |
| 701 | accatcgaat | ggcgcaaaac | ctttcgcggt | atggcatgat | agcgcccgga | 750 |
| 751 | agagagtcaa | ttcagggtgg | tgaatgtgaa | accagtaacg | ttatacgatg | 800 |
| 801 | tcgcagagta | tgccggtgtc | tcttatcaga | ccgtttcccg | cgtggtgaac | 850 |
| 851 | caggccagcc | acgtttctgc | gaaaacgcgg | gaaaaagtgg | aagcggcgat | 900 |
| 901 | ggcggagctg | aattacattc | ccaaccgcgt | ggcacaacaa | ctggcgggca | 950 |
| 951 | aacagtcgtt | gctgattggc | gttgccacct | ccagtctggc | cctgcacgcg | 1000 |
| 1001 | ccgtcgcaaa | ttgtcgcggc | gattaaatct | cgcgccgatc | aactgggtgc | 1050 |
| 1051 | cagcgtggtg | gtgtcgatgg | tagaacgaag | cggcgtcgaa | gcctgtaaag | 1100 |
| 1101 | cggcggtgca | caatcttctc | gcgcaacgcg | tcagtgggct | gatcattaac | 1150 |
| 1151 | tatccgctgg | atgaccagga | tgccattgct | gtggaagctg | cctgcactaa | 1200 |
| 1201 | tgttccggcg | ttatttcttg | atgtctctga | ccagacaccc | atcaacagta | 1250 |
| 1251 | ttattttctc | ccatgaagac | ggtacgcgac | tgggcgtgga | gcatctggtc | 1300 |
| 1301 | gcattgggtc | accagcaaat | cgcgctgtta | gcgggcccat | taagttctgt | 1350 |
| 1351 | ctcggcgcgt | ctgcgtctgg | ctggctggca | taaatatctc | actcgcaatc | 1400 |
| 1401 | aaattcagcc | gatagcggaa | cgggaaggcg | actggagtgc | catgtccggt | 1450 |
| 1451 | tttcaacaaa | ccatgcaaat | gctgaatgag | ggcatcgttc | ccactgcgat | 1500 |
| 1501 | gctggttgcc | aacgatcaga | tggcgctggg | cgcaatgcgc | gccattaccg | 1550 |
| 1551 | agtccgggct | gcgcgttggt | gcggacatct | cggtagtggg | atacgacgat | 1600 |
| 1601 | accgaagaca | gctcatgtta | tatcccgccg | ttaaccacca | tcaaacagga | 1650 |
| 1651 | ttttcgcctg | ctggggcaaa | ccagcgtgga | ccgcttgctg | caactctctc | 1700 |
| 1701 | agggccaggc | ggtgaagggc | aatcagctgt | tgcccgtctc | actggtgaaa | 1750 |
| 1751 | agaaaaacca | ccctggcgcc | caatacgcaa | accgcctctc | cccgcgcgtt | 1800 |
| 1801 | ggccgattca | ttaatgcagc | tggcacgaca | ggtttcccga | ctggaaagcg | 1850 |
| 1851 | ggcagtgagc | gcaacgcaat | taatgtaagt | tagctcactc | attaggcacc | 1900 |
| 1901 | gggatctcga | ccgatgccct | tgagagcctt | caacccagtc | agctccttcc | 1950 |
| 1951 | ggtgggcgcg | gggcatgact | atcgtcgccg | cacttatgac | tgtcttcttt | 2000 |
| 2001 | atcatgcaac | tcgtaggaca | ggtgccggca | gcgctctggg | tcattttcgg | 2050 |
| 2051 | cgaggaccgc | tttcgctgga | gcgcgacgat | gatcggcctg | tcgcttgcgg | 2100 |
| 2101 | tattcggaat | cttgcacgcc | ctcgctcaag | ccttcgtcac | tggtcccgcc | 2150 |
| 2151 | accaaacgtt | tcggcgagaa | gcaggccatt | atcgccggca | tggcggcccc | 2200 |
| 2201 | acgggtgcgc | atgatcgtgc | tcctgtcgtt | gaggacccgg | ctaggctggc | 2250 |
| 2251 | ggggttgcct | tactggttag | cagaatgaat | caccgatacg | cgagcgaacg | 2300 |
| 2301 | tgaagcgact | gctgctgcaa | aacgtctgcg | acctgagcaa | caacatgaat | 2350 |
| 2351 | ggtcttcggt | ttccgtgttt | cgtaaagtct | ggaaacgcgg | aagtcagcgc | 2400 |
| 2401 | cctgcaccat | tatgttccgg | atctgcatcg | caggatgctg | ctggctaccc | 2450 |
| 2451 | tgtggaacac | ctacatctgt | attaacgaag | cgctggcatt | gaccctgagt | 2500 |
| 2501 | gatttttctc | tggtcccgcc | gcatccatac | cgccagttgt | ttaccctcac | 2550 |
| 2551 | aacgttccag | taaccgggca | tgttcatcat | cagtaacccg | tatcgtgagc | 2600 |
| 2601 | atcctctctc | gtttcatcgg | tatcattacc | cccatgaaca | gaaatccccc | 2650 |
| 2651 | ttacacggag | gcatcagtga | ccaaacagga | aaaaaccgcc | cttaacatgg | 2700 |
| 2701 | cccgctttat | cagaagccag | acattaacgc | ttctggagaa | actcaacgag | 2750 |
| 2751 | ctggacgcgg | atgaacaggc | agacatctgt | gaatcgcttc | acgaccacgc | 2800 |
| 2801 | tgatgagctt | taccgcagct | gcctcgcgcg | tttcggtgat | gacggtgaaa | 2850 |
| 2851 | acctctgaca | catgcagctc | ccggagacgg | tcacagcttg | tctgtaagcg | 2900 |
| 2901 | gatgccggga | gcagacaagc | ccgtcagggc | gcgtcagcgg | gtgttggcgg | 2950 |
| 2951 | gtgtcggggc | gcagccatga | cccagtcacg | tagcgatagc | ggagtgtata | 3000 |
| 3001 | ctggcttaac | tatgcggcat | cagagcagat | tgtactgaga | gtgcaccata | 3050 |
| 3051 | tatgcggtgt | gaaataccgc | acagatgcgt | aaggagaaaa | taccgcatca | 3100 |
| 3101 | ggcgctcttc | cgcttcctcg | ctcactgact | cgctgcgctc | ggtcgttcgg | 3150 |
| 3151 | ctgcggcgag | cggtatcagc | tcactcaaag | gcggtaatac | ggttatccac | 3200 |
| 3201 | agaatcaggg | gataacgcag | gaaagaacat | gtgagcaaaa | ggccagcaaa | 3250 |
| 3251 | aggccaggaa | ccgtaaaaag | gccgcgttgc | tggcgttttt | ccataggctc | 3300 |
| 3301 | cgcccccctg | acgagcatca | caaaaatcga | cgctcaagtc | agaggtggcg | 3350 |
| 3351 | aaacccgaca | ggactataaa | gataccaggc | gtttccccct | ggaagctccc | 3400 |
| 3401 | tcgtgcgctc | tcctgttccg | accctgccgc | ttaccggata | cctgtccgcc | 3450 |
| 3451 | tttctccctt | cgggaagcgt | ggcgctttct | catagctcac | gctgtaggta | 3500 |
| 3501 | tctcagttcg | gtgtaggtcg | start= ttcgctccaa | gctgggctgt | gtgcacgaac | 3550 |
| 3551 | cccccgttca | gcccgaccgc | tgcgccttat | ccggtaacta | tcgtcttgag | 3600 |
| 3601 | tccaacccgg | taagacacga | cttatcgcca | ctggcagcag | ccactggtaa | 3650 |
| 3651 | caggattagc | agagcgaggt | atgtaggcgg | tgctacagag | ttcttgaagt | 3700 |
| 3701 | ggtggcctaa | ctacggctac | actagaagga | cagtatttgg | tatctgcgct | 3750 |
| 3751 | ctgctgaagc | cagttacctt | cggaaaaaga | gttggtagct | cttgatccgg | 3800 |
| 3801 | caaacaaacc | accgctggta | gcggtggttt | ttttgtttgc | aagcagcaga | 3850 |
| 3851 | ttacgcgcag | aaaaaaagga | tctcaagaag | atcctttgat | cttttctacg | 3900 |
| 3901 | gggtctgacg | ctcagtggaa | cgaaaactca | cgttaaggga | ttttggtcat | 3950 |
| 3951 | gaacaataaa | actgtctgct | tacataaaca | gtaatacaag | gggtgttatg | 4000 |
| 4001 | agccatattc | aacgggaaac | gtcttgctct | aggccgcgat | taaattccaa | 4050 |
| 4051 | catggatgct | gatttatatg | ggtataaatg | ggctcgcgat | aatgtcgggc | 4100 |
| 4101 | aatcaggtgc | gacaatctat | cgattgtatg | ggaagcccga | tgcgccagag | 4150 |
| 4151 | ttgtttctga | aacatggcaa | aggtagcgtt | gccaatgatg | ttacagatga | 4200 |
| 4201 | gatggtcaga | ctaaactggc | tgacggaatt | tatgcctctt | ccgaccatca | 4250 |
| 4251 | agcattttat | ccgtactcct | gatgatgcat | ggttactcac | cactgcgatc | 4300 |
| 4301 | cccgggaaaa | cagcattcca | ggtattagaa | gaatatcctg | attcaggtga | 4350 |
| 4351 | aaatattgtt | gatgcgctgg | cagtgttcct | gcgccggttg | cattcgattc | 4400 |
| 4401 | ctgtttgtaa | ttgtcctttt | aacagcgatc | gcgtatttcg | tctcgctcag | 4450 |
| 4451 | gcgcaatcac | gaatgaataa | cggtttggtt | gatgcgagtg | attttgatga | 4500 |
| 4501 | cgagcgtaat | ggctggcctg | ttgaacaagt | ctggaaagaa | atgcataaac | 4550 |
| 4551 | ttttgccatt | ctcaccggat | tcagtcgtca | ctcatggtga | tttctcactt | 4600 |
| 4601 | gataacctta | tttttgacga | ggggaaatta | ataggttgta | ttgatgttgg | 4650 |
| 4651 | acgagtcgga | atcgcagacc | gataccagga | tcttgccatc | ctatggaact | 4700 |
| 4701 | gcctcggtga | gttttctcct | tcattacaga | aacggctttt | tcaaaaatat | 4750 |
| 4751 | ggtattgata | atcctgatat | gaataaattg | cagtttcatt | tgatgctcga | 4800 |
| 4801 | tgagtttttc | taagaattaa | ttcatgagcg | gatacatatt | tgaatgtatt | 4850 |
| 4851 | tagaaaaata | aacaaatagg | ggttccgcgc | acatttcccc | gaaaagtgcc | 4900 |
| 4901 | acctgaaatt | gtaaacgtta | atattttgtt | aaaattcgcg | ttaaattttt | 4950 |
| 4951 | gttaaatcag | ctcatttttt | aaccaatagg | ccgaaatcgg | caaaatccct | 5000 |
| 5001 | tataaatcaa | aagaatagac | cgagataggg | ttgagtgttg | ttccagtttg | 5050 |
| 5051 | gaacaagagt | ccactattaa | agaacgtgga | ctccaacgtc | aaagggcgaa | 5100 |
| 5101 | aaaccgtcta | tcagggcgat | ggcccactac | gtgaaccatc | accctaatca | 5150 |
| 5151 | agttttttgg | ggtcgaggtg | ccgtaaagca | ctaaatcgga | accctaaagg | 5200 |
| 5201 | gagcccccga | tttagagctt | gacggggaaa | gccggcgaac | gtggcgagaa | 5250 |
| 5251 | aggaagggaa | gaaagcgaaa | ggagcgggcg | ctagggcgct | ggcaagtgta | 5300 |
| 5301 | gcggtcacgc | tgcgcgtaac | caccacaccc | gccgcgctta | atgcgccgct | 5350 |
| 5351 | acagggcgcg | tcccattcgc | ca | 5372 |
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文献和实验DYCZ一28A、28B、28C、28D、29、30型夹芯式垂直电泳槽
螺母,取出胶框,剥出玻璃板,在两块玻璃板下角空隙内,用刀片背面轻轻撬动,即可将胶面与一块玻璃板分开,将有胶板的玻璃板平放在桌上,双手轻轻沿凝胶底将胶片托起,放在大培养皿中染色,胶板经漂洗、脱色后即可看到清晰的分离条带。 注:DYCZ—28B、29型夹芯式电泳槽使用方法与此相同。DYCZ—28C型、28D型和30型电泳槽使用方法也与此相同,因是制作两块胶板,故实际形成三个贮液槽。请注意在操作时两个胶室的短玻璃板都要向里,中间为负极,两边为正极。 注意:可作两块胶的电泳槽,在作一块胶时,应将三头
加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α(+)载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α(+)载体骨架连接基因片段1小时,载体末端和插入末端的比例为1:3(fmol)。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21(DE3)在冰上混合10分钟,并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
的 miR-29b 递送可以抑制 UUO 小鼠模型中的肾纤维化 [1]Ding WY, Kuzmuk V, Hunter S, Lay A, Hayes B, Beesley M, Rollason R, Hurcombe JA, Barrington F, Masson C, Cathery W, May C, Tuffin J, Roberts T, Mollet G, Chu CJ, McIntosh J, Coward RJ, Antignac C, Nathwani A, Welsh GI
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