支原体琼脂培养基（含精氨酸）

支原体污染的特点及检验（3）

网友eming43的经验 支原体的检测． PCR法 原理 该法是通过PCR技术将支原体16srRNA基因特异性扩增，来检测培养细胞中污染的支原体。PCR引物选自16sr RNA基因上的支原体特异片段，此片段与其他细菌的序列无交叉性杂交反应。扩增产物用琼脂糖凝胶电泳，经溴乙啶（EB）染色后在紫外透射仪上进行检测。 u 16sr DNA引物用水稀释至40umol/L。　　（1）.正向引物：5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAGTA-3’　　（2）.反向

支原体污染的特点及检验（1）

类物质、部分种类需要精氨酸、O 2或葡萄糖，每一种支原体都有自身持点。多数支原体适合于偏碱条件下生存(PH7.6—8.0)，对酸耐受性差。对热比较敏感，对一般抗生素不敏感。 支原体污染细胞后。培养液可不发生混浊。多数情况下细胞病理变化轻微或不显著，细微变化也可由于传代、换液而缓解。因此易被忽视。但个别严重者，可致细胞增殖缓慢。甚至从培养器皿脱落。 为确定有无支原体污染可做如下检酗： ①相差显微境检测：将细胞按种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上，24h后取出，用相差油镜观察。支原体呈暗色微小

支原体培养的问与答

时加入 5% CO2 生长更好。生长缓慢，在琼脂含量较少的固体培养基上孵育 2～3 天出现典型的「荷包蛋样」菌落：圆形（直径 10～16μm），核心部分较厚，向下长入培养基，周边为一层薄的透明颗粒区。此外，支原体还能在鸡胚绒毛尿囊膜或培养细胞中生长。二、常见问题：1、你好，请问我想要根据药典 2010 三部做支原体检测，需要哪些培养基？精氨酸支原体肉汤培养基的作用是什么？ 药典上说用支原体肉汤培养基，想问问是否带精氨酸，还有支原体琼脂培养基是需要含精氨酸吗？我们是检测看我们的培养的细胞是不是支原体