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- 2025年09月28日
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常温
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8×10高速增感屏
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联硕生物
联硕生物是一家专业经营生物、仪器、试剂、耗材的公司，在广大客户的支持及公司全体员工不懈的努力下，公司的服务和业务网络已遍及全国，成为了国内生命科学领域产品的主要供应商之一。自成立以来，联硕生物一直秉承客户至上、服务至诚；诚信为本的理念，致力于做靠谱放心的专业服务商，助力您的科研成就！
主营品牌：Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等
主营产品:
试剂盒：ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、分子生物学试剂盒、细胞凋亡试剂盒
细胞培养：血清，专业培养基，常用传统培养基
耗材：进口、国产细胞培养耗材、普通实验耗材
生化试剂：原装进口生化试剂、进口分装生化试剂、国产生化试剂
抗体：进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗等
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文献和实验加入：Labeling 5× buffer 10 μl（含有随机引物）dNTPmix 2 μl(含 dCTP、dGTP、dTTP 各 0.5 mM)BSA（小牛血清白蛋白）2 μl[ a -32 P]dATP 3μlKlenow 酶 5 U3. 将变性模板 DNA 加入到上管中，加 ddH2O 至 50 μl，混匀。室温或 37 ℃ 1 hr。4. 加 50 μl 终止缓冲液终止反应。标记后的探针可以直接使用或过柱纯化后使用。由于 a -32 P 的半衰期只有 14 天，所以标记好的探针应尽快使用。探针的比活性最好
SSC ， 0.1%SDS 的塑料盒内，将盒盖好，置于水平振荡器上，温和振荡 10 min 。 5． 将膜转移至另一含有 100~200ml 预热至 68 ℃、含 0.1%SDS 的 0.5 × SSC 的塑料盒中。 68 ℃下温和振荡 10min 。 6． 重复步骤 5 ，再洗涤至少 2 次，使 68 ℃下共洗涤 3 次。 7． 在印迹纸上晾干膜，然后让膜于 -70 ℃下在含增感屏的暗盒内对 X 线片（ Kodar XAR-5 或相应的胶片）放射自显影 24
l 终止反应，标记的探针可直接使用或采用柱层析分离标记好的探针。 4． 点样膜于杂交前漂洗，放入杂交袋中，加入适量预杂交液 2ml/10cm2 在杂交温度下预杂交 10 ～ 60min ，将适量标记探针加入预杂交液中，杂交 1h ～过夜。 5． 洗膜， 2 × SSPE 和 0.1 ％ SDS 于杂交温度洗 2 次，最后根据探针的 Tm 值调整洗膜 2 次。 6． － 70 ℃放射自显影，用保鲜膜包好杂交膜，放入暗盒，加增感屏，再放置 X 线片，置低温
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