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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
1年
- 英文名：
gRNA2 cas9 (two in one, 2000 ng)
- 库存：
大量
- 供应商：
信裕生物
质粒编号: 34
质粒名称: gRNA2 cas9 (two in one, 2000 ng)
其他名称:
质粒大小（bp）:
抗性:
质粒类型:
是否病毒:
启动子:
稳转或瞬转:
组成型或诱导性:
表达水平:
蛋白标签:
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文献和实验CRlSPR/Cas9是细菌和古生物菌用来抵抗外来质粒或噬菌体等遗传物质入侵的一种获得性免疫系统。利用CRlSPR/Cas9技术建立哺乳动物全基因组突变库或者与某类功能相关的基因突变体库，通过功能性筛选和富集以及随后的PCR扩增和深度测序分析，发掘与筛选表型相关的基因，称为CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选。gRNA文库是药物筛选或靶向筛选特定通路的理想工具，gRNA文库的建立将在功能基因筛选、疾病机制研究及药物研发等方面发挥重要的功能。 CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选流程
CRISPR-Cas9 全程实操教程：从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
基本原理CRISPR-Cas9 是一种细菌获得性免疫，用于降解入侵的外源 DNA。CRISPR RNA (crRNA) 与转录激活 crRNA (Trans-activating crRNA， tracrRNA) 退火形成的复合物能特异性识别与其互补的基因组序列，引导 Cas9 核酸内切酶在目的片段生成 DNA 双链断裂，如下图所示。通过基因工程手段对 crRNA 和 tracrRNA 进行改造，将其连接在一起得到 sgRNA (single guide RNA)。通过将表达 sgRNA
9-KRAB）要靶向 TSS 附近约 −50 到 +100 bp 的窗口； CRISPRa（dCas9-VP64 / SAM）要靶向 TSS 上游约 −400 到 −50 bp； 用敲除的逻辑去设计 CRISPRi 的 gRNA，是常见的低级错误。 --- 二、序列层面的硬禁忌，一条都不能碰 拿到候选序列后，先做这几项过滤： PAM 必须正确：SpCas9 是 3' 端 NGG；SaCas9 是 NNGRRT；SpCas9-NG 是 NG；SpRY 几乎不依赖 PAM。用错 PAM 模型会得到完全
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
