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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1X10^6 cells
- 供应商:
ATCC
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
外周血;T淋巴细胞
- 相关疾病:
正常
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
不详
- 细胞形态:
淋巴母细胞
- 是否是肿瘤细胞:
不详
- 器官来源:
外周血;T淋巴细胞
- 运输方式:
冻成管或活细胞
- 生长状态:
悬浮生长
- 规格:
株
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 细胞名称: | ATCC CCL-119(CCRF-CEM), CCRF-CEM, 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 |
| 存储人: | GE Foley |
| 种属来源: | 人 |
| 组织来源: | 外周血;T淋巴细胞 |
| 疾病特征: | 白血病, 急性淋巴细胞白血病 |
| 细胞形态: | 淋巴母细胞 |
| 生长特性: | 悬浮生长 |
| 培养基: | RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 |
| 产品目录号: | CCL-119 |
| 生长条件: | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, |
| 传代方法: | 1:2至1:6,每周2次。 |
| 冻存条件: | 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 |
| 支原体检测: | 阴性 |
| 安全等级: | 1 |
| 应用: | 该细胞可以作为转染宿主细胞。 |
| STR: |
Amelogenin: X
CSF1PO: 10,11
D13S317: 11,12
D16S539: 10,13
D5S818: 12,13
D7S820: 9,13
THO1: 6,7
TPOX: 8
vWA: 17,19
|
| 同工酶: |
ADA, 1
ES-D, 1
G6PD, B
GLO-I, 1
PEP-D, 1
PGD, C
PGM1, 1
PGM3, 0
|
| 备注: |
Nucleotide (GenBank) : Z23090 H.sapiens mRNA for 28 kDa heat shock protein.
Nucleotide (GenBank) : AF146431 Homo sapiens cell-line CCRF-CEM sodium/hydrogen exchanger isoform 1 mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : Z12846 HSA08C081 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 08C08, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z13104 HSA25H071 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 25H07, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z13398 HSA45A081 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 45A08, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z13431 HSA48B021 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 48B02, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z13562 HSA57F051 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 57F05, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z13677 HSA65D041 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 65D04, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z13711 HSA68F071 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 68F07, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z13717 HSA69C041 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 69C04, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z15500 HSA23D012 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 23D01, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z15555 HSA27A032 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 27A03, mRNA sequence.
Nucleotide (GenBank) : Z16011 HSA56G072 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 56G07, mRNA sequence.
|
| 参考文献: |
Foley GE, et al. Continous culture of human lymphoblasts from peripheral blood of a child with acute leukemia. Cancer 18: 522-529, 1965. PubMed: 14278051
Sandstrom PA, Buttke TM. Autocrine production of extracellular catalase prevents apoptosis of the human CEM T-cell line in serum-free medium. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 4708-4712, 1993. PubMed: 8506323
Adams RA. Formal discussion: the role of transplantation in the experimental investigation of human leukemia and lymphoma. Cancer Res. 27: 2479-2482, 1967. PubMed: 4170381
Uzman BG, et al. Morphologic variations in human leukemic lymphoblasts (CCRF-CEM cells) after long-term culture and exposure to chemotherapeutic agents. A study with the electron microscope. Cancer 19: 1725-1742, 1966. PubMed: 5224274
Adams RA, et al. Leukemia: serial transplantation of human leukemic lymphoblasts in the newborn Syrian hamster. Cancer Res. 27: 772-783, 1967. PubMed: 4295047
|
1)收到细胞后当天换液,全部更换成客户自己的新鲜培养基,放进培养箱,第二天再消化。
2)边观察边消化,根据细胞的形态,终止消化时间,采取以半分钟间隔吹打细胞边缘,如可吹打下来,即终止消化。客户摸索比较好的消化时间。
3)随细胞有一份细胞操作说明书,请客户仔细查看。
4)记得加1%双抗,降低被污染的概率。另外尽早冻存留种,以备后用。
5)售后时间为一周,QC检测合格后发货保证细胞状态良好,收到细胞7天内出现状态不佳等情况请及时反馈,会有技术同步指导操作协助解决,如仍未养活免费重发。
6)收到细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请您务必重视。
7)刚收到细胞时,胎牛血清可以用15%培养两三天,利于细胞尽快恢复状态,细胞状态稳定后,再调回10%即可。
(其中1,2条针对于贴壁细胞,悬浮细胞详情请见细胞操作说明书)
ATCC CCL-119细胞传代操作步骤:
(一)贴壁细胞传代
1)提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3)加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4)用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
(二)悬浮细胞传代
1)将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2)弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
细胞常见问题及解决方案:
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。3)对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
4)对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。
一毫升小管操作方法 小管内也是此细胞:
1. 用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)。
2. 严格无菌操作,用吸管吸出管中细胞至9ml完全培养基混匀。
3. 1000rpm,5min离心,重悬细胞。
4.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO7 培养。
ATCC CCL-119细胞培养的环境
1.无污染环境:化学污染,微生物污染。
2.温度环境:37℃。偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强。
3.气体环境:95%空气加5%二氧化碳。
4.酸性环境:大多数细胞的适于PH为7.2-7.4,细胞耐酸性比较耐碱性大一些。
5.细胞培养基:合成培养基,天然培养基。
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文献和实验mahaizhi 各位前辈,请教一下在国内能不能购买到ATCC的原装细胞,有没有哪家公司或者什么机构是ATCC在国内的指定代理。如果有的话,请不吝赐教联系方式。谢谢。 ddh382 我也想知道 veimojie ATCC 在中国的总代理是北京中原公司 比较放心 都是ATCC原装干冰包装发给客户 有兴趣可以去公司主页看看 网址http://www.sinozhongyuan.com/index
1肝细胞悬液。分离的肝细胞经0.6%台盼蓝拒染法测得细胞活力大于90%,高碘酸雪夫反应显示糖原法鉴定99%为肝实质细胞。 将上述肝细胞悬液分别加入24孔(每孔1 ml)和96孔(每孔0.1 ml)培养板中,置37℃,5%CO2培养箱中培养。12~16 h后可见肝细胞贴壁于培养板孔底上生长。 2 CCl4诱导肝细胞坏死性损伤模型的建立 肝细胞培养12 h后,吸弃上清,更换培养液并加入不同浓度的CCl4〔(1~16 mmol・L-1),以少量的二甲亚砜助溶,二甲亚砜终浓度
1肝细胞悬液。分离的肝细胞经0.6%台盼蓝拒染法测得细胞活力大于90%,高碘酸雪夫反应显示糖原法鉴定99%为肝实质细胞。 将上述肝细胞悬液分别加入24孔(每孔1 ml)和96孔(每孔0.1 ml)培养板中,置37℃,5%CO2培养箱中培养。12~16 h后可见肝细胞贴壁于培养板孔底上生长。 2 CCl4诱导肝细胞坏死性损伤模型的建立 肝细胞培养12 h后,吸弃上清,更换培养液并加入不同浓度的CCl4〔(1~16 mmol・L-1),以少量的二甲亚砜助溶,二甲亚砜终浓度
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