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信裕生物
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文献和实验相关专题 一、 实验目的 学习和掌握转化大肠杆菌 的通用方法,并进行转化子的筛选 二、 实验原理 转化(transformation)是将一种生物(供体)的遗传物质(通常为DNA)转入另一种生物(受体)并使其在受体中得以保存和繁殖的过程。大肠杆菌不是天然感受菌,在低温(0~5℃)环境下经CaCl2处理,细胞壁变松变软后能摄入外源DNA,这种状态称为感受态细胞(competent cell)。经CaCl2处理后大肠杆菌
.SOC/Amp 固体培养基:SOB 中另外添加20 mM glucose 及100 μg/mL ampicillin.SOC 液体培养基: SOB 中加入20 mM glucose (使用前加入)。大肠杆菌菌株: JM109#1~#5 接合反应液方法步骤:1) 进行转形实验前16~20 h,自 -70℃取出贮存的菌种,以划单一菌落方式将菌株JM109 接种在SOB固体培养基上,在37℃培养。2) 取40 mL SOB培养基装入125 mL已灭过菌的三角瓶 (请记得加入Mg2+)。 另取1 mL
碧云天生产的超级感受态细菌制备试剂盒(Supercompetent Cell Preparation Kit)是一种用于快速制备高转化效率大肠杆菌 感受态细菌的试剂盒。超级感受态细菌制备试剂盒是在传统超级感受态细菌制备方法的基础上进行适当改良而成,操作便捷,转化效率高。使用本试剂盒可以使感受态效率达到108-109 cfu/μg质粒。对于小的质粒效率略高,而对于大的质粒则效率略低一些。用本试 剂盒制备的超级感受态细菌不仅可以转化质粒,而且非常适合于转化普通的连接产物,特别适合于转化平端
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