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信裕生物
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文献和实验zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题,未得其解,恳请帮助。 做荧光素酶报告基因的时候,检测的是细胞因子的启动子。换句话说,是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内,通过刺进因素作用后,检测启动子的表达情况。这个是背景。 问题是,怎么通过使用内参的方法,去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。 因为,个人认为,细胞数对报告基因的表达量影响比较大。 谢谢。 daidaiyidaidai
成线性关系,如下面式子所示: 因此,萤火虫检测法能被用于检测任何能够形成或降解 ATP 的酶或代谢物。典型的将萤火虫荧光素酶用于分子生物学领域是在关于 真核生物 DNA 的表达调节研究中被用作评价基因转染的报告基因 (2, 5) 。 在这个应用实例中,我们描述了荧光素酶检测的两个例子 PicaGene LT 2.0 和 LT 7.5 luciferase kits (Toyo Ink 制造 , Wako Pure Chemical Ind., Ltd. 销售 ) 。 使用辅酶
生物发光是一种依赖于酶和底物的相互作用来产生光的化学过程。所需的酶被称为荧光素酶,底物因荧光素酶的类型而不同(如荧光素)。 常用荧光素酶信息表: 其中最有代表性的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶,分别命名为萤火虫荧光素酶(FLuc)和海肾荧光素酶(RLuc),同时近年来研究得较多的是来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶(GLuc)。 萤火虫荧光素酶(FLuc)作为最通用和最常见的报告基因,该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性,可用于原核和真核细胞。FLuc
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