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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
388
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100T/400T
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒怎么卖在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒怎么卖
产地:国产|进口
编号:XH014
品牌:百奥莱博
规格:100T/400T
原理简介
本试剂盒利用独特的缓冲液,可从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA*(代"片")段,同时除去其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。
对于切下后不超过150mg的凝胶块,本试剂盒(以100T为例)可用100T。对于更小的凝胶块,本试剂盒使用次数更多。
注意事项
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
3、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
4、回收<200bp DNA*(代"片")段时,应加大溶胶液的体积(如5倍体积或者更高)。
5、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
6、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤
1.将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的离心管中,称取凝胶重量(可以用同一包装中的离心管去皮称量,各离心管间的误差可忽略)。
2.向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100µl,则加入300µl溶胶液,如为小片段,可加入5倍体积或者更高体积),50-55℃水浴放置5-10分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
3.玻璃奶混匀。取25ul混匀的玻璃奶加入上面溶解的溶胶液中。混匀。
4.室温放置2-3分钟。期间可翻转混匀1-2次。
5.10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清(70%乙醇洗两次,无水乙醇洗一次)。
6.室温放置10分钟,加入30-50ul TE缓冲液混匀溶解,50-55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
7.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
北京现货琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒怎么卖极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·辣根过氧化物酶(HRP)标记套装
编号:XH087
规格:一套
保存条件:HRP(辣根过氧化物酶)-20度保存,透析袋2-8度处理。其他常温保存。
产品说明:本套装是将HRP标记的常用试剂集合为一体而成。本操作流程为经碘的高碘酸氧化法。适合于蛋白等含有氨基物质的标记。特别是抗体的标记。
如果待标记物分子量太小(如小于15KD),可能会穿过透析袋而造成样品损失。
标记原理:在低PH下使RP经NaIO4氧化后形成的醛基可蛋白等分子的氨基相连,形成斯夫氏硷,后者可进一步用NaBH4还原生成稳定的酶标记物。
操作方法:
一, 标记量的计算:HRP(辣根过氧化物酶)分子量为40KD左右。一般为HRP:待标记物=2:1到4:1之间。比如抗体IgG分子量一般为150-160KD。则10mg HRP可标记抗体在10mg-20mg之间。
二, 计算好各步反应时间。作好开始标记的准备工作,最好是从下午开始。将HRP(辣根过氧化物酶)一共10mg加入1ml双蒸水溶解。溶解后可放-20度存放一个月。如果想作两次标记,可适当称量5mg。但并不推荐称量更小的质量。以免产生更大误差。而且透析袋一般也只够两次用量。
三, 剪切合适长度透析袋,用双蒸水清洗三次备用。透析袋分宽窄两种,适合于不同量样品的透析,请自己安排。称取21.3mg NaIO4,加入0.5ml双蒸水溶解(现配现用,浓度为0.2M),将100mM乙酸钠(PH4.4)用双蒸水稀释100倍成1mM乙酸钠(PH4.4)。准备待标记物,如果待标记物本身盐含量很低并且缓冲力差,如生理盐水,可等二天再准备。如果不确定,将0.2M PH9.5 CB稀释20倍(请不要一次稀释完,留1-2ml左右备用),作为透析液,将待标记物装入透析袋中4℃透析过夜,透析袋适当留长约2ml体积的量以备第二天加入酶(透析袋使用请见附录)。
四, 以一次标记完为例,如果标记量小,可按比例减小试剂的用量。取0.2ml现配的NaIO4溶液加入HRP溶液中,混匀,避光常温反应两小时。装入透析袋中,在稀释过的乙酸钠(PH4.4)溶液中4℃透析过夜(透析袋使用请见附录)。
五, 第二天早上,如果样品为固体,可用水溶解,加入1/20体积的0.2M PH9.5 CB,混匀。取出活化好的HRP装入一适合离心管中,加入50ul 0.2M PH9.5 CB,混匀,立刻加入待标记物中,混匀。避光常温反应两小时。
六, 加0.1ml新配的10mg/ml NaBH4液,混匀,常温半小时。
七, 配制合适的透析液,如生理盐水或者PBS等。透析酶标记物。
八, 如果有条件进一步纯化,可透析半天后去进一步纯化,如果不纯化,请在4℃透析至少24小时。勤换液。
附透析袋使用方法:
本透析袋已预处理过,用双蒸水清洗后将水用适当吸一下。就可直接使用。透析袋上下都可以用铁夹,但如果铁夹不够用,下部可用细线或者其他的透析袋夹。
将透析袋轻轻的折上两到三折。用线或者透析袋夹封住,上面支开,加入待透析物,留一定量的空气在顶上,并小心的折一折,用铁夹夹住,轻轻的挤压,如没发现有液体流出,可放入透析液中。一般透析可用纯净水瓶去顶使用。用一次性筷子或者其他合适物穿过铁夹,将透析袋吊在透析液中,补充透析液,使透析液盖过透析袋中的液面而不要淹过铁夹下面。
北京现货琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒怎么卖关键词:百奥莱博,琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,XH014
·核酸助沉剂(Acryl Carrier)
编号:XH037
规格:1ml/10ml
主要性能介绍:
乙醇低温沉淀是回收液体样品中的DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉淀至少会丢失样品中核酸的30%左右。如果液体样品中的核酸浓度很低或DNA<200bp,乙醇沉淀只能回收50%的DNA和RNA。
核酸助沉剂(Acryl Carrier)是一种分子生物学级Acryl多聚物溶液,在乙醇沉淀时加入其5-10μl即可明显提高核酸沉淀的得率,更可使痕量DNA的回收率达到98~100%,同时可选择性去除短引物片段和dNTP。
本身绝无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性,同时不影响酶切、连接、转录、PCR、转化转染等,也不影响核酸电泳和DNA-蛋白相互作用。
核酸助沉剂(Acryl Carrier)已成为最常用的核酸助沉剂。
应该方面:
(1) 提高DNA或RNA沉淀的得率。例如,提高质粒产量,提高RNA提取得率等
(2) 痕量DNA或RNA回收。
(3) 沉淀回收标记探针,去除未标记dNTP。
使用方法:
(1) 加5-20μl核酸助沉剂(Acryl Carrier)到1 ml DNA或RNA溶液,继续进行所选择的核酸沉淀操作。
(2) 加5-20μl核酸助沉剂(Acryl Carrier)到1 ml TRIpure提取试剂,继续进行RNA提取操作。
(3) 加5-20μl核酸助沉剂(Acryl Carrier)r到1 ml 质粒提取液,继续进行质粒提取操作。
储存: 4℃,有效期24个月。
北京现货琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒怎么卖关键词:百奥莱博,琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,XH014
PY02-257 胆盐乳糖增菌液 250克
BL0619 肝素-琼脂糖凝胶6FF Heparin Sepharose 6FF
单宁酶 Span 60 9025-71-2
磷酸烯醇丙酮酸单钾盐 Fast Garnet GBC salt 4265-07-0
ARB11562 人流感病毒抗体IgG(FLU)含量分析 Human influenza viruses igg,flu ELISA KIT
0030011 冻干粉兔血浆 0.5ml/支×10
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BTN80804 柱式真菌RNAOUT Column Fungal RNAOUT
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文献和实验Q:利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段? A: 可能有以下几个原因: 1. 胶块未完全溶解,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数辅助溶解; 2. 胶块体积太大,应先将其切为小块,分多次回收; 3. 电泳缓冲液pH太高,硅基质膜在高盐低pH结合DNA,如pH太高,应作适当调整; 4. 漂洗液中未加入无水乙醇。 Q:能否改用去离子水洗脱? A:可以。但是实验室所用纯水一般pH偏低,可利用NaOH适当调高
琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化核酸和蛋白质片断的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳片段的回收将在以后的文章中介绍,在这里我先介绍一下琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法,方便大家学习交流。从琼脂糖凝胶中回收DNA,是一种简单不过的常规实验操作。但是由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验――比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR扩增、标记乃至显微注射等等,所以这一步的操作也显得非常重要。胶回收的质量好否直接影响后继实验的成功与否。现今除了手工回收方法外,许多公司都开发了方便的回收试剂盒
DNA;低盐、高pH值情况下释放DNA。离心柱上含有Resin合成树脂,具有吸附DNA的功能),配备设计独特的离心吸附柱式结构,使用常规台式高速离心机 ,在几分钟之内即可以高效回收核酸片段。 三、 仪器与试剂 实验仪器 1、琼脂糖凝胶电泳系统 2、紫外观察分析仪 3、离心机 4、单面刀片 5、恒温水浴锅 试剂 1、 DNA回收试剂盒 溶胶液:6 M NaClO 4 (pH 5.2
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









