n-十二烷基β-D-麦芽糖苷

鉴定分析植物蛋白复合物的蓝绿非变性凝胶电泳

方法。与这两种方法相比，BNPAGE 具有更高的分辨率。2. 材料 2.1 BN-PAGE 样品的制备 ( 1 ) 十二烷基 β-D-麦芽糖苷增溶液：1.0% 十二烷基 β-D-麦芽糖苷（RoChe，BaSel，Switzerland) ， 50 mmol/L BisTris，750 mmol/L 氨基乙酸，0.5 mmol/L EDTA，pH 7.0，4°C 贮藏备用。使用前加入苯甲基磺酰氟（PMSF) [ 终浓度为 2 mmol/L，储液配制：200 mmol/L PMSF ( m

双向电泳前去垢剂和离液剂对蛋白质的增溶作用

] ，或精心选择的非离子型去垢剂 [11] 都可以溶解膜蛋白。有趣的是，Triton X-100 只与尿素合用不如与尿素-硫脲合用更有效 [11] 。这个发现已延伸到其他低聚乙二醇去垢剂家族，如 Brij 去垢剂，如线性烷基寡聚乙二醇化合物 [11] 。然而，最有效的非离子型去垢剂属于糖苷家族（如辛基葡萄糖苷、十二烷基麦芽糖苷），而后者在单独与尿素使用 [12] 和与尿素-硫脲使用 [ 11，13] 同样有效。由于不同去垢剂的选择而引起蛋白质溶解多样化的例子见图 12-1。溶解过程中发挥作用的多种变量

膜蛋白的分离、鉴定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE 和 MALDI-TOF-MS 方法

葡萄糖苷。 ( 2 ) 增溶缓冲液：5 mmol/L BTP-MES ( pH 7.5 )，20% (m/m) 甘油和 0.5%(V/V) 蛋白酶抑制剂混合物（Sigma 公司）。 ( 3 ) 洗脱缓冲液：3 mmol/L BTP-MES ( pH 7.5 ) ，1.5 mmol/L 十二烷基-β-D-麦芽糖苷（DM ) 和 20% 甘油（m/m) 。 ( 4 ) Laemmli 样品缓冲液：4% ( m/V ) 十二烷基磺酸锂，20% ( m/m ) 甘油，10%(V/V)  2-巯基