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Histone Demethylase Assay (Fluorescent)
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大量
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Active Motif
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48 rxns
Active Motif 独有的组蛋白分析技术为研究者提供一套全面组蛋白分析方案,帮助研究者解决从组蛋白纯化到染色质组装过程中组蛋白翻译后修饰的问题。
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Active Motif公司是一家致力于研发和生产核细胞分子生物学和表观遗传学研究用试剂的专业公司,也是世界著名的转录因子试剂生产商和CHIP-seq外包服务供应商。Active Motif的产品涉及:表观遗传学相关抗体、Chip级别抗体、重组识别子和催化酶、预甲基化修饰的重组组蛋白、多聚核小体和生物素标记核小体;以及各类染色质分析、转录因子表达调控分析和DNA甲基化分析的试剂盒等。
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文献和实验在检测试剂盒的设计上。典型 HMT 检测试剂盒用 3H-SAM 作甲基供体,并将 S-腺苷高半胱氨 酸 (SAH) 测定为甲基化反应的一般副产物。但是,这需要 处理放射性物质 较高的灵敏度,以克服甲基供体 SAM 的低 kcat(转化数通常 预先纯化酶/蛋白复合物,以评估特定 HMTs 的活性 比色或荧光检测简便,无放射性 与核提取物或纯化蛋白的相容性(检测试剂盒对目标修饰具有特异性) 3 小时内即可提供数据 表征去甲基酶活性 组蛋白去甲基化酶活性检测试剂盒通常测定
的作用是调控基因表达。例如组蛋白甲基化多导致基因沉默,去甲基化则相反;乙酰化一般是转录激活,去乙酰化则相反。当然,也可在此基础上产生复杂的生物学效应。例如组蛋白去乙酰化酶 HDAC 可影响免疫系统;H3K4me3、H3K9me2 能够调控记忆的形成, 而且 H3K 甲基化与 X 染色体失活、基因组印记和异染色质形成有关;H3 乙酰化通过多种机制调控以来 ATP 的染色质重塑 ,并参与炎症反应;H2A、H2B 泛素化则与 DNA 损害反应有关;而 H3S28 磷酸化与 H3K27 乙酰化可激活转录
性,当与羧酸结合时,可中和氨基酸负电荷。甲基化是由甲基转移酶介导的,S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 是主要的甲基供体。涉及甲硫氨酸循环。甲基化如此频繁,以至于 SAM 被认为是 ATP 之后酶促反应中最常用的底物。此外,尽管 N-甲基化不可逆,但 O-甲基化可能可逆。甲基化是众所周知的表观遗传调控机制,因为组蛋白甲基化和去甲基化会影响 DNA 的转录可用性。氨基酸残基可以偶联到单个甲基或多个甲基上,以增加修饰的效果。下图提供了与核小体核心颗粒相关的 PMT 的图解。图示:与组蛋白颗粒相关的翻译后修饰。核小体
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