蛋白质电泳分子量标准（蛋白marker 43.0-200.0

干货：小分子量蛋白（11KD）WB实验艰辛历程及经验总结

个人工作多年以后再回来读博的，所以实验技术什么的从头学起，这其中WB走的弯路最多，现在就和大家聊聊我个人的历程，并交流一下自己的经验。这个经验是我跑一个11KD分子量分泌性蛋白得出的，肯定不会适用于所有情况，但是论坛里面受困于小分子量蛋白WB的朋友还是很多，所以聊胜于无，在此分享一下。我搞得蛋白质是一个11KD的分泌性蛋白，并且是我实验设计中一个重要的指标，最初学习WB技术，受困于二抗不合格一直连内参都做不出来。。。后面改换抗体之后，才相对顺利一点，其他指标也相继出来了。所以抗体真的很重

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量（垂直板型电泳）（图）

。 Ferguson公式：1gmR=1gm0-KRC 该公式原来是Ferguson提出来描述蛋白质在淀粉凝胶中电泳行为的，后来证明它也同样适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳，式中mR是蛋白质在一定浓度凝胶（C）中的迁移率；m0是当凝胶浓度外推到零时的迁移率即自由迁移率，它与蛋白质的净电荷量（q）成正比，与蛋白质在溶液中的摩擦系数（f）成反比（m0∝q/f，f由溶液的粘滞性、蛋白质分子的大小和形状决定）；KR是阻滞系数（retardation coefficient），它与蛋白质分子量成线性关系。因此，不同的蛋白质分子

蛋白标准品（Marker）知识汇总

蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错，另外提醒一句，特别小的蛋白Marker条带如果要显色好，上样一定要上足够的量哦。 二.预染蛋白分子量标准 预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物，通过与染料共价耦联，在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验，这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后，以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如，已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处。如果使用预染Marker