地塞米松（Dexamethasone）ELISA检测试剂盒

一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中地塞米松的残留量。
二、适用范围
定量检测鸡肉、猪肉等组织样品中地塞米松的残留。
三、试剂盒特点及技术指标
* 检 测 时 间 ： 40 min
* 试剂盒灵敏度： 0.2pb(µg/kg)
* 试剂盒提供工作浓度标准品，使用更方便；
* 试剂盒检测样本的灵敏度和准确度：

样本	检测下限	回收率
鸡肉	1pb	70%-120%
猪肉	1pb	70%-120%

试剂盒特异性：

药物名称	交叉反应率（%）
地塞米松	100%
地克珠利	＜ 1%

四、所需材料
仪器：微孔板酶标仪450 nm/630 nm、振荡器、离心机、刻度移液管（10 mL）、洗耳球、天平（感量0.01 g）、离心管（5 mL, 50 mL）、漏斗、分液漏斗、烧杯、定量分析滤纸
微量移液器：单道 1µL～10 µL、10 µL～100µL
多道 50µL～300µL
试剂：甲醇、去离子水。
五、 试剂盒组成

序号	组成部分	96T装量
1	地塞米松酶标板	12×8孔
2	地塞米松标准品*6	6×1 mL
3	地塞米松酶标物	7 mL
4	地塞米松抗体	7mL
5	底物液A液	7 mL
6	底物液B液	7 mL
7	终 止 液	7 mL
8	20×浓缩洗涤液	40 mL
9	2×地塞米松样品稀释液	40mL

*注：A、B、C、D、E、F 6个标准品浓度为：0ppb, 0.2ppb, 0.6ppb,1.8ppb, 5.4ppb, 16.2 ppb，直接使用。
六：溶液配制
配液1: 洗涤工作液
用去离子水将20 ×浓缩洗涤液按1 : 19体积比进行稀释。配好的洗涤工作液在4 ℃环境可保存一 个月，用前一天取出回温。
配液2: 1×地塞米松样品稀释液
用去离子水将2×地塞米松样品稀释液按1:1体积比进行稀释，用于样本的稀释，配好后在4℃环境可保存一个月，用前一天取出回温。
七、样本前处理
样本处理前须知：
① 处理完的样品应及时进行下步检测，实验中必须使用一次性吸头，吸取不同试剂时要更换吸头。
② 样本数目超过8个时推荐使用排枪加样。
鸡肉、猪肉


八、 酶标免疫测定程序

• 将所需试剂从冷藏环境中取出，待其完全回 升至室温（20～25℃）后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
• 按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。
• 加标准品/样品、酶、抗体：加标准品/样品50µL到对应的微孔中，加入地塞米松酶标物50µL/孔，再加入地塞米松抗体50µL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃环境中反应30min。
• 洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，

加入洗涤工作液250µL/孔，每次静置20s，甩去孔内液体，重复洗涤3次，最后一次用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。

• 显色：加入底物液A液50µL/孔，再加底物

液B液50µL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10min。

• 测定：加入终止液50µL/孔，用酶标仪立即 测定450nm处的吸光度值（建议用双波长450/630nm）检测。

九、 结果判定
以标准品百分吸光率为纵坐标，以地塞米松标准品浓度（ppb）的半对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中地塞米松实际浓度。（详见试剂盒专业分析软件，以便进行大量样本的分析计算。）
十、 注意事项
① 洗板拍干后应立即进行下一步操作。
② 反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。
③ 不使用过了有效期的试剂盒，不交换使用不同批号的试剂。
④ 0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为10～15min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到20min，反之则减短反应时间。
十一、贮藏条件及保存期
贮藏条件： 2～8℃
保 质 期： 12个月