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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 英文名:
pDsRed2-Mito
- 库存:
100
- 供应商:
kelei-bio
- 规格:
20μl
启动子: CMV
复制子: pUC ori,f1 ori
终止子: SV40 poly(A) signal
质粒分类: 哺乳细胞,荧光蛋白报告载体
质粒大小: 4715bp
原核抗性: Kan 筛选标记: Neo
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃,有氧 LB
表达宿主: 哺乳细胞
诱导方式: 无须诱导,瞬时表达
5'测序引物: CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
3'测序引物: Sv40-polyA-R:GAAATTTGTGATGCTATTGC
质粒简介
pDsRed2-Mito is a mammalian expression vector that encodes a fusion of Discosoma sp. red fuorescent protein (DsRed2) and the mitochondrial targeting sequence from subunit VIII of human cytochrome c oxidase (Mito). The Mito sequence is fused to the 5'-end of DsRed2, a human codon-optimized DsRed variant that is engineered for faster maturation and lower non-specifc aggregation. The Mito sequence targets the Mito-DsRed2 fusion protein to the host cell’s mitochondria.
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文献和实验所有酸性液泡。pDsRed2-mito:载体,转染后表达一个融合蛋白(红色荧光蛋白+线粒体基质定位信号),可用来检测线粒体被自噬掉的程度(Mitophagy)。MitoTraker 探针:特异性显示活的线粒体,荧光在经过固定后还能保留。Hsp60:定位与线粒体基质,细胞死亡时不会被释放。Calreticulin(钙网织蛋白):内质网腔。 Note:这些蛋白均为胞浆蛋白,爬片或胰酶消化的细胞在做免疫荧光前需先透膜(permeablize),可采用 0.1% SDS 处理。 参考文献:
LysoTrackerTM 探针:有红或蓝色可选,显示所有酸性液泡。 pDsRed2-mito:载体,转染后表达一个融合蛋白(红色荧光蛋白+线粒体基质定位信号),可用来检测线粒体被自噬掉的程度(Mitophagy)。 MitoTraker探针:特异性显示活的线粒体,荧光在经过固定后还能保留。 Hsp60:定位与线粒体基质,细胞死亡时不会被释放。 Calreticulin(钙网织蛋白):内质网腔 (注意:这些蛋白均为胞浆蛋白,爬片或胰酶消化的细胞在做免疫荧光前需先透膜(permeablize
啦之类的那一块。这家伙是得了炸药奖的。Clontech公司构建了大量荧光定位质粒,如pEGFP-N1,pDsRed2-N1,pDsRed-Monomer-C1等等。 萤光,英文luminescence,即发光或称生物发光,是指萤火虫荧光素酶,海肾荧光素酶等在底物存在(实际上还需要ATP,氧,辅酶A等,这些试剂盒中已经加入)下发出的光,是生物化学反应,他的实质是酶,没有底物是不能发光的。把LUC利用的最好的是PROMEGA公司,他们有大量试剂盒是基于这两种荧光素酶的,最常见的是检测启动子或增强子活性
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