pDONR223-CXCR4质粒

Gateway技术：克隆、表达新方法

库。 克隆资源因为已克隆到Gateway改造过的载体，所以可以快速地将基因转到各种表达系统中。 图4 进入Gateway系统的各种路线 * 目前的克隆资源带有attB位点，需要与pDONR质粒重组五、触手可及的最高级表达系统 一旦您构建好Gateway入门克隆，蛋白表达和分析的大门就会向您敞开。使用Gateway技术，您可以进入到几乎是无数种的表达系统。因为没有一个单一的表达系统蛋白适合于每一种蛋白，优化基因表达的最好方法是在多个系统中分析您的蛋白（图5）。 图5 在Gateway

让肿瘤变「热」！宋尔卫院士团队Nat Immunol发文报道肿瘤免疫治疗新策略

1 和/或 CTL 细胞计数患者的效应 T 细胞 RGS1 表达上调。此外，Th1 和/或 CTL 细胞中 RGS1 高表达的患者预后更差。图片来源：Nature ImmunologyRGS1 如何影响 T 细胞向肿瘤迁移？为了确定 RGS1 在效应 T 细胞迁移中的作用，作者敲低 RGS1 表达后发现，CTL 和 Th1 细胞向 CXCR3、CCR4 和 CXCR4 的配体迁移的能力增强。图片来源：Nature Immunology先前的研究表明 RGS 蛋白通过增强 GTP 酶活性来抑制趋化因子受体的细胞

【原创】说一说我用Gateway的经验兼答疑

是线性的，如果用质粒必须做酶切，但是事实证明用超螺旋的质粒结果没有区别。5. 同理，用引物在目的基因上下游加入AttL序列后直接进行LR反应也是可行的，可以省去BP反应相关的材料和费用。但是pDONR系列载体自有其优点（载体小，拷贝数高，卡那霉素抗性，容易测序），所以要按实际情况权衡6. 慢病毒载体的空白质粒有大量的重复序列，久存会导致LR反应成功但是转化后抽不出质粒的情况，需要注意。