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文献和实验培养条件:RPMI-1640培养液,10%(胎牛或小牛)血清,5%CO2,37度饱和湿度孵箱培养。细胞生长状态:上皮样贴壁生长。传代:细胞长满95%->弃培养液->0.25%胰酶消化2min->弃掉胰酶->加入培养液吹打贴壁细胞,将细胞悬液分瓶传代。若一传二,则3天长满;若一传三,则需要4-5天长满。
我正在培养MCF-7细胞,在此介绍一下我给细胞传代的经验:细胞放在显微镜下观察,细胞无污染、退缩,等其长满培养瓶约70%-80%时即可进行传代操作,具体步骤如下:1、 打开瓶盖,弃上清,2.D-HANK‘S夜(以50ml培养瓶为例,下同)2、吸管清洗后弃之;3、加0.25%胰酶2吸管;4、轻摇晃后置入37度温箱;5、3-5分钟后置显微镜下观察,见细胞胞质退缩,变圆;6、吸去胰酶,加含10%FCS的RPMI1640 3吸管;7、用洗管吹打,见细胞脱落,培养液变混,即可吸出加到新的培养瓶中。注意
happy_840524 请问一下高手,我的MCF-7细胞老是养养就长出触角,而且长出触角后越长越慢,复苏了再养还是这样,我觉得我的培养液和操作都没有问题,因为另外一个细胞养的挺好,请高手指点。 r1990en 我也是这种情况啊,不知道楼主的问题最后是怎么解决的? 冬天的落阳 我的细胞也这样 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验
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