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低温保存
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现货
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鹿森生物
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瓶装
一般描述
PHA-L是一种浓度范围窄的有效淋巴细胞有丝分裂原。需要钙和锰离子才能发挥活性。还发现它可用作顺行神经元示踪中的特异性标记。洗脱:100 mM乙酸。
洗脱:100 mM乙酸。
警告
毒性:标准处理(A)
重悬
在1 ml 10 mM磷酸钠缓冲液(pH值8.0)中复溶,以产生最终缓冲液浓度为15 mM磷酸盐,10 mM NaCl和痕量Ca+2。
复溶后,等分并冷冻保存(-20°C)。贮备液在-20°C下可稳定保存几个月。
分析说明
通过SDS-PAGE进行匀浆
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文献和实验在于它们能识别糖蛋白和糖肽中,特别是细胞膜中复杂的碳水化合物结构,即细胞膜表面的碳脂化合物决定簇。一种凝集素具有对某一种特异性糖基专一性结合的能力,如刀豆素与α―D―吡喃糖基甘露糖(α―D―Mannopyranosy)结合;麦芽素与N―乙酰糖胺(N―acetyl glucosamine)结合;菜豆凝集素与N―乙酰乳糖胺结合。 因此,凝集素可以作为一种探针来研究细胞膜上特定的糖基。另一方面,凝集素具有多价结合能力,能与荧光素、生物素、酶、胶体金和铁蛋白等示踪物结合,从而在光镜与/或电镜水平显示其结合
结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀,常用牛血清白蛋白,卵白蛋白,聚乙二醇或明胶作稳定剂。用Sephacryb S—400 (丙烯葡聚糖S—400 )层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。一、待标记蛋白质的准备(1)透析除盐:蛋白质溶液内应除去多余的电解质,不然过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位,影响蛋白质的吸附,因此,标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水(0.005mol/L NaCl , pH7.0)透析。(2)去除蛋白质中的
丙酮酸钠 3. 促细胞分裂剂(终浓度) 5 μg/ml PHA:1 mg/ml母液-20℃分装冻存 25 μg/ml 刀豆凝集素A(conA):0.4 mg/ml母液-20℃分装冻存 商陆促分裂原:再水华母液-20℃分装冻存二、实验步骤 1. 收集10 ml全血,加入不含防腐剂的肝素(0.2 ml肝素/10 ml全血)。实验全过程保持无菌操作。 2. 在15 ml离心管中的肝素化血中加入1 ml 6%葡萄糖,室温放置20~30 min,沉降红细胞。沉降时间不宜过长
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