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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pPICZα C
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 别名: | pPICZalpha C |
|---|---|
| 质粒类型: | 毕赤酵母表达载体 |
| 表达水平: | 高拷贝 |
| 启动子: | AOX1 |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3598 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´ |
| 3' 测序引物及序列: | 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
| 载体标签: | C-Myc, C-His |
| 筛选标记: | Zeocin (博莱霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1337 | pPICZα C | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
pPICZα A,B和C是3.6 kb的毕赤酵母蛋白分泌表达载体。表达的重组蛋白是融合蛋白,含有一个N-端多肽,编码酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)α-因子分泌信号。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水 平的表达目的蛋白,并且可以用在任何毕赤酵母中,包括X33,GS115菌株,SMD1168H,KM71H。
pPICZα A,B和C系列载体包含以下元素:
- 5'端含有AOX1启动子的严格调控,利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因(Ellis等,1985; Koutz等人,1989;tschopp等人,1987A)。
- α-因子分泌信号能够分泌性表达目的蛋白。 •Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选(Baron等人,1992; Drocourt等人,1990)。
- C-端含Myc和His标签,可以用于检测和纯化重组蛋白。
- pPICZ A, B, C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。
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文献和实验加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α(+)载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α(+)载体骨架连接基因片段1小时,载体末端和插入末端的比例为1:3(fmol)。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21(DE3)在冰上混合10分钟,并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
广义的细胞色素 c是含有血红素 c的细胞色素之总称。通常是指主要存在于高等动植物、酵母、霉菌等线粒体中的细胞色素 c,起着传递电子的作用。为分子量约 1.3万的碱性蛋白质,还原型的吸收带为 550、 520、 415毫微米,氧化型为 407毫微米。α 因此很早便被研究,并获得结晶。不仅一级结构而且立体结构也已清楚(图 1)。其结构基本上是生物界共有的。由细胞色素 c氧化酶〔细胞色素( a+ a3 )复合体〕氧化。在呼吸链中从细胞色素 c开始接受电子,各种还原酶都已清楚
α-酮戊二酸脱氢酶 α-ketoglutarate dehy-drogenase
三羧酸循环中的一种酶。是一种催化α -酮戊二酸琥珀酰 CoA反应的复合酶,需要 NAD和 CoA为辅基。 EC. 1. 2. 4、 2 α -酮戊二酸 CoA NAD 琥珀酰 CoA NADH H 此外,尚有 TPP、核酸、 FAD参予反应。整个反应机制与丙酮酸脱氢酶催化的反应极为相似。分子量约 250万。 主要为 3种单位酶组成:α -酮戊二酸酶(硫辛酰胺)( EC1. 2. 4. 2产生琥珀二氢核糖酸,分子
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