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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pLKO.3G
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | RNAi载体 |
|---|---|
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | U6 |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 8174bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | LKO.1 5':GACTATCATATGCTTACCGT |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | eGFP |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1415 | pLKO.3G | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验66xiaogai 求教:我要构建一个逆转录病毒载体,不知道在插入外源基因(shRNA)时需不需要考虑像一般的载体表达时考虑基因错配的问题,如果加入的外源基因上带有启动子,那逆转录病毒载体上的启动子要切掉么?谢谢。 破茧的蝶 楼主问题解决了吗?现在遇到同样的困惑~~ shylook 最好用shRNA的vector吧 比如PLKO等等 不是的话 你要看载体自身带不带ATG 带
一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector(OpenBiosystems) 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因(pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2)和包被质粒(pMD2.G)(Addgene) 3. 脂质体2000(Invitrogen) 4.OptiMEM无血清培养基(Invitrogen) 5. 293T包装细胞(ATCC)
克隆载体 pRCII 转入大肠杆菌为例。TA 克隆载体 pRCII 含有 LacZ 基因,多克隆酶切位点位于其间,当没有外源基因插入 LacZ 基因中时,LacZ 基因的启动子可使此基因编码半乳糖苷酶,从而催化底物 X-gal 发生化学反应,菌落变成蓝色;当外源基因与 pRCII 载体发生连接时,LacZ 基因失活,菌落呈白色;同时该质粒还含有氨苄青霉素耐药基因。根据此特性,白色菌落含有重组质粒。在用这种质粒进行克隆时,转化平板培养基中要加入 0.5 mM IPTG、50 g/mL 氨
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