| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pRI201-AN-GUS |
| 质粒类型: | 双子叶植物载体;农杆菌双元表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 克隆方法: | 限制性内切酶,多克隆位点 |
| 启动子: | -- |
| 载体大小: | 12220 bp |
| 5' 测序引物及序列: | 35S promoter 5’CTATCCTTCGCAAGACCCTTC 3’ |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | 无 |
| 载体抗性: | 卡那霉素 |
| 筛选标记: | 卡那霉素、Neomycin |
| 克隆菌株: | HB101 |
| 宿主细胞(系): | 植物细胞、农杆菌 |
| 备注: | pRI201-AN-GUS载体是一种在双子叶植物细胞中高效表达外源基因的载体;表达GUS报告基因;利用发根土壤杆菌介导。 |
| 产品目录号: | ZY3266 |
| 稳定性: | 稳表达 |
| 组成型/诱导型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃低温保存
- 保质期:
三年
- 英文名:
pRI201-AN-GUS
- 库存:
20
- 供应商:
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息

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文献和实验【求助】关于克隆包含pri-miRNA的基因组片段到表达载体来表达miRNA的问题
zwmc 很多文章使用这种方法来表达miRNA, 而且我在论坛上看到很多坛友也比较推崇这个方法。但是我最近遇到了问题:我想要克隆表达的miRNA具有5p和3p两种剪切形式,理论上我把包含该pri-miRNA的基因组片段到表达载体在细胞里表达之后,这种情况下我表达出来的miRNA是兼有5p 3p两种形式?或者是只有一种呢? 很困惑,请大家不吝赐教! 吴佰霖 1. 查文献,看这个miRNA的5p和3p是否都有表达
类似物的瞬时表达方式。miRNA的过表达载体中有插入成熟miRNA、pre-miRNA及pri-miRNA序列三种形式。其中pri-miRNA(含侧翼序列)的方式由于保留了每个microRNA独自的原始天然双臂结构,效果更好,是应用最为广泛的方法。microRNA过表达系统中有CMV启动子(II型启动子)和H1启动子(III型启动子)两种方式供选择。III型启动子(H1、U6等)具有表达效率高、有效的确定终止位置等优点,成为首选。II型启动子适用于pri-miRNA序列中有连续的5个T-导致III
系统表达全长开放阅读框 大肠杆菌GUS基因、人类MAP4和Eif-4E基因平行转移进目的载体,在Sf9昆虫细胞(杆状病毒)或大肠杆菌BL21-SI菌株表达天然蛋白、N-端His或N-端GST融合蛋白。在所有的系统中均观察到GUS良好的表达,而MAP4只在昆虫细胞中表达,Eif-4E只在大肠杆菌中表达。在Hartley, J.L.et al. (2000) Genome Research 10(11):1788-95 可以找到更多的细节。 为了扩展表达的选择,Invitrogen 已将
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