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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Exonuclease V (RecBCD)
- 库存:
722
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
5KU|1KU
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货核酸外切酶 V (RecBCD)供应,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货核酸外切酶 V (RecBCD)供应
编号:SV1082
英文名:Exonuclease V (RecBCD)
规格:5KU|1KU
产地:国产|进口
特性:
去除线性单链和双链 DNA,但对切刻和超螺旋质粒 DNA 无作用
概述:
核酸外切酶 V 是从 E. coli 提取的 RecBCD 复合蛋白,具有几种不同的活性,包括 ATP 依赖型单链 DNA 内切酶活性、单链和双链 DNA 外切酶活性。反应具有双向(3´ 和 5´ 端)持续性,产物为寡脱氧核苷酸(1, 2, 3)。所有核酸外切酶 V 的酶活都需要二价阳离子参与,外切酶活性需要 Mg2+,Ca2+ 会抑制外切酶活性,并有解旋酶活性,将双链 DNA 打开,但不水解(4, 5)。
来源:
纯化自 E. coli 菌株,该菌株含有表达核酸外切酶 V(含 RecB,RecC,RecD 三个亚基)的质粒。
反应条件:
1X BalbBuffer 4
[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 1 mM DTT (pH 7.9)],加入 1 mM ATP,37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 30 分钟。
质保声明:
核酸外切酶 V 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指在 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
浓度:
10,000 units/ml。
除北京现货核酸外切酶 V (RecBCD)供应外,我公司正在打折促销以下产品:
·cAMP 依赖性蛋白激酶(PKA)
编号:SV1578
规格:500KU|100KU
概述:
可逆性地在蛋白质上添加磷酸基对真核细胞信号转导起着重要作用,蛋白磷酸化和去磷酸化参与调节细胞活动的各个方面。随着已知蛋白激酶数量飞速增长,确定细胞中哪种蛋白激酶与哪种底物相互作用就变得更具挑战性。通过对比磷酸化位点的氨基酸序列与已知底物序列来找到的共有磷酸化位点序列已被证实是一种有效方法,这些序列有助于预测潜在的蛋白质底物中特定蛋白激酶磷酸化位点。
由于决定蛋白激酶特异性涉及复杂的三维结构,这些较短的氨基酸序列只描述了磷酸基接受位点周围的一级结构,因此把问题简单化了(见综述 1),没有考虑到二级及三级结构,也没有考虑到其它多肽链或者同链中位置稍远处的因素,此外,在特定序列中并不是所有残基对于激酶的识别及磷酸化具有同等影响,因此,使用这些序列时应该慎重。
另一方面,这些共有序列已经被证实是识别的关键序列,简单化了的序列使得它们在研究蛋白激酶与其底物中更有用。基于共有序列合成的寡肽,除了能预测磷酸化位点以外,往往还是蛋白激酶活性测定的理想底物。
下表列出了 我公司提供的蛋白激酶特异性序列,磷酸基接受位点用红色标出,可以进行功能替换的氨基酸用斜杠(/)标出,对识别贡献不大的氨基酸用“X”表示。
某些蛋白激酶在它们的识别序列中包括磷酸氨基酸残基,被称为“hierarchical”白激酶(见综述 3),如:CKI 和 GSK-3。它们通常需要另一个激酶预先在它们自己的磷酸化位点附近磷酸化,S(P)表示这种预先存在的丝氨酸残基。
北京现货核酸外切酶 V (RecBCD)供应关键词:SV1082,核酸外切酶 V (RecBCD),Exonuclease V (RecBCD),RECBCD
·PleI限制性内切酶
编号:SV0591
英文名称:PleI Restriction Endonuclease
规格:5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
5,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
Plel是Mlyl的不完全同裂酶。
·MscI限制性内切酶
编号:SV0487
英文名称:MscI Restriction Endonuclease
规格:1250U|1250U|250U|125U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
5,000和25,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dcm甲基化敏感。
pBR322 上唯一的 Mscl 位点与 dcm 甲基化位点重叠,因此,只有在 dcm- 宿主菌中生长的 pBR322 才能被用于克隆。
注意事项:
Mscl是Ball的完全同裂酶。
北京现货核酸外切酶 V (RecBCD)供应关键词:SV1082,核酸外切酶 V (RecBCD),Exonuclease V (RecBCD),RECBCD
·PCR Marker
编号:SV1287
规格:500gel lanes|100gel lanes|50gel lanes
特性:
我公司为琼脂糖凝胶电泳提供一系列分子量从 25 bp 到 48.5 kb 的 DNA Ladder。
室温稳定
条带清晰均一
易于识别的参照带
提供一管凝胶上样染料,紫色(6X)
样品粗略定量
浓度:
2-Log 和 50 bp 的 DNA Ladders 为 1,000 μg/ml。1kb、100 bp 和低分子量 DNA Ladder 为 500 μg/ml。 PCR Marker 为 300 μg/ml。Fast DNA Ladder 为 25 μg/ml。
·ZraI限制性内切酶
编号:SV0789
英文名称:ZraI Restriction Endonuclease
规格:1KU|200U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 25%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
Zral是Aatll的不完全同裂酶。
·稀释液 C
编号:SV0823
英文名称:ZraI Restriction Endonuclease
规格:5ml
概述:
如果在使用过程中需要稀释内切酶,建议稀释后浓度不要低于 1,000units/ml。详细信息请参见 282 页,根据内切酶产品货号查阅限制性内切酶的稀释兼容性表选择稀释液的种类,表中列出了所有内切酶所需稀释液种类。
贮存条件:
-20℃。
稀释液成分:
稀释液 A:
50mM KCl,10mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM dithiothreitol,200 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @
25℃)。
稀释液 B:
300mM NaCl,10mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM dithiothreitol,500 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @25℃)。
稀释液 C:
250mM NaCl,10mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM dithiothreitol,0.15% Triton X-100,200 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @ 25℃)。
注意:以上稀释液不能用于稀释嗜热聚合酶。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销售生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京现货核酸外切酶 V (RecBCD)供应。
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文献和实验Detection and Quantitation of RecBCD Enzyme (Exonuclease V) Activity
The RecBCD enzyme serves two functions in the bacterial cell: it is a nuclease that destroys linear double-stranded DNA (dsDNA), and a DNA helicase that generates single-stranded DNA (ssDNA) used by RecA protein to initiate homologous
蛋白质。其中Exo蛋白是一种核酸外切酶,结合在双链DNA的末端,从5'端向3'端降解DNA,产生3'突出端;Beta蛋白结合在单链DNA上,介导互补单链DNA退火,Gam蛋白可与RecBCD酶结合,抑制其降解外源DNA的活性。 ▲ Red 同源重组流程 Red同源重组技术具有同源序列短(40-60 bp)、重组效率高等特点。采用该转化体系时,可在宿主的任意靶位点进行基因敲除、敲入和点突变等操作,目前该方法在大肠杆菌中的应用已经十分成熟。 此外,还有RecA重组敲除系统(由RecA
结构,在形成发夹的过程中,缺口部位插入P―核苷酸(绿色)。 a发夹结构随即被内切酶切开,该剪切可在末端的4个核苷酸间任意切开。 C随后,核酸外切酶作用,任意去除D、 J基因末端核苷酸,该外切酶剪切作用可贯穿基因重排的后续过程之中。 n随即由TdT介导基因末端N―核苷酸的添加(浅黄色)。正在双链解开和重新成对的过程中,N-区域随机发生末端核苷酸的剪切以及N―核苷酸的添加。 F最后D、J基因末端连接,完成重排。 1.P―核苷酸形成 在V-D-J重排过程中,重组信号序列末端的连接
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