pPICZ B载体

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  • 2025年07月13日
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      三年

    • 英文名

      pPICZ B

    • 库存

      20

    • 供应商

      泽叶生物

    pPICZB载体基本信息

    出品公司: ZYbscience
    载体名称: pPICZB, pPICZ B
    质粒类型: 毕赤酵母蛋白表达载体
    表达水平: 高拷贝
    启动子: AOX1
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 3328 bp
    5' 测序引物及序列: 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´
    3' 测序引物及序列: 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´
    载体标签: C-Myc, C-His
    载体抗性: Zeocin 博来霉素
    筛选标记: HIS4
    备注:
    插入基因是必需包含起始密码子ATG。
    产品目录号: ZY190-20
    稳定性: 稳定 Stable
    组成型: 组成型 Constitutive
    病毒/非病毒: 非病毒

    pPICZB载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pPICZ B载体图谱

    pPICZ B多克隆位点

    pPICZB载体简介

    pPICZ A,B和C是3.3 kb的毕赤酵母蛋白载体。表达的重组蛋白是融合蛋白,含有一个C-端多肽,多太重含c-myc和C-His标签。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水 平的表达目的蛋白,并且可以用在任何毕赤酵母中,包括X33,GS115菌株,SMD1168H,KM71H。

    pPICZ系列载体包含以下元素:

    •5'片段含有AOX1启动子的严格调控,利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因(Ellis等,1985; Koutz等人,1989;tschopp等人,1987A)。

    •Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选(Baron等人,1992; Drocourt等人,1990)。

    •C-端含Myc和His标签,可以用于检测和纯化重组蛋白。

    •pPICZ A, B, C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。

    pPICZB载体序列

    LOCUS       pPICZ B           3328 bp ds-DNA    circular 
    DEFINITION  Pichia pastoris vector for methanol-inducible intracellular 
                expression of a protein.
    ACCESSION   .
    VERSION     .
    KEYWORDS    pPICZ B
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    COMMENT     This file is created by Vector NTI
                http://www.biofeng.com/
    COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    COMMENT     Linearize with SacI, PmeI, or BstXI for integration at the AOX1 
                locus.
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..3328
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /lab_host="Pichia pastoris"
                         /mol_type="other DNA"
         promoter        2..940
                         /gene="Pichia pastoris AOX1"
                         /note="AOX1 promoter"
                         /note="inducible promoter, regulated by methanol"
                         /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
         misc_feature    932..1011
                         /note="MCS"
                         /note="multiple cloning site"
                         /note="color: #99ccff"
         CDS             1010..1039
                         /codon_start=1
                         /product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"
                         /note="Myc"
                         /note="color: #cc99b2"
                         /translation="EQKLISEEDL"
         CDS             1055..1072
                         /codon_start=1
                         /product="6xHis affinity tag"
                         /note="6xHis"
                         /note="color: #cc99b2"
                         /translation="HHHHHH"
         terminator      1152..1398
                         /gene="Pichia pastoris AOX1"
                         /note="AOX1 terminator"
                         /note="transcription terminator for AOX1"
                         /note="color: #ffffff"
         promoter        1438..1824
                         /gene="S. cerevisiae TEF1"
                         /note="TEF1 promoter"
                         /note="promoter for EF-1-alpha"
                         /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
         promoter        1832..1879
                         /note="EM7 promoter"
                         /note="synthetic bacterial promoter?"
                         /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
         CDS             1898..2272
                         /codon_start=1
                         /gene="Sh?ble from?Streptoalloteichus hindustanus"
                         /product="antibiotic-binding protein"
                         /note="BleoR"
                         /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and 
                         Zeocin(TM)"
                         /note="color: #ccffcc"
                         /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD
                         VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR
                         EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"
         terminator      2338..2585
                         /gene="S. cerevisiae CYC1"
                         /note="CYC1 terminator"
                         /note="transcription terminator for CYC1"
                         /note="color: #ffffff"
         rep_origin      complement(2660..3248)
                         /direction=LEFT
                         /note="ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
                         /note="color: #ffff00"
    ORIGIN
            1 agatctaaca tccaaagacg aaaggttgaa tgaaaccttt ttgccatccg acatccacag
           61 gtccattctc acacataagt gccaaacgca acaggagggg atacactagc agcagaccgt
          121 tgcaaacgca ggacctccac tcctcttctc ctcaacaccc acttttgcca tcgaaaaacc
          181 agcccagtta ttgggcttga ttggagctcg ctcattccaa ttccttctat taggctacta
          241 acaccatgac tttattagcc tgtctatcct ggcccccctg gcgaggttca tgtttgttta
          301 tttccgaatg caacaagctc cgcattacac ccgaacatca ctccagatga gggctttctg
          361 agtgtggggt caaatagttt catgttcccc aaatggccca aaactgacag tttaaacgct
          421 gtcttggaac ctaatatgac aaaagcgtga tctcatccaa gatgaactaa gtttggttcg
          481 ttgaaatgct aacggccagt tggtcaaaaa gaaacttcca aaagtcggca taccgtttgt
          541 cttgtttggt attgattgac gaatgctcaa aaataatctc attaatgctt agcgcagtct
          601 ctctatcgct tctgaacccc ggtgcacctg tgccgaaacg caaatgggga aacacccgct
          661 ttttggatga ttatgcattg tctccacatt gtatgcttcc aagattctgg tgggaatact
          721 gctgatagcc taacgttcat gatcaaaatt taactgttct aacccctact tgacagcaat
          781 atataaacag aaggaagctg ccctgtctta aacctttttt tttatcatca ttattagctt
          841 actttcataa ttgcgactgg ttccaattga caagcttttg attttaacga cttttaacga
          901 caacttgaga agatcaaaaa acaactaatt attcgaaacg aggaattcac gtggcccagc
          961 cggccgtctc ggatcggtac ctcgagccgc ggcggccgcc agctttctag aacaaaaact
         1021 catctcagaa gaggatctga atagcgccgt cgaccatcat catcatcatc attgagtttg
         1081 tagccttaga catgactgtt cctcagttca agttgggcac ttacgagaag accggtcttg
         1141 ctagattcta atcaagagga tgtcagaatg ccatttgcct gagagatgca ggcttcattt
         1201 ttgatacttt tttatttgta acctatatag tataggattt tttttgtcat tttgtttctt
         1261 ctcgtacgag cttgctcctg atcagcctat ctcgcagctg atgaatatct tgtggtaggg
         1321 gtttgggaaa atcattcgag tttgatgttt ttcttggtat ttcccactcc tcttcagagt
         1381 acagaagatt aagtgagacc ttcgtttgtg cggatccccc acacaccata gcttcaaaat
         1441 gtttctactc cttttttact cttccagatt ttctcggact ccgcgcatcg ccgtaccact
         1501 tcaaaacacc caagcacagc atactaaatt ttccctcttt cttcctctag ggtgtcgtta
         1561 attacccgta ctaaaggttt ggaaaagaaa aaagagaccg cctcgtttct ttttcttcgt
         1621 cgaaaaaggc aataaaaatt tttatcacgt ttctttttct tgaaattttt ttttttagtt
         1681 tttttctctt tcagtgacct ccattgatat ttaagttaat aaacggtctt caatttctca
         1741 agtttcagtt tcatttttct tgttctatta caactttttt tacttcttgt tcattagaaa
         1801 gaaagcatag caatctaatc taaggggcgg tgttgacaat taatcatcgg catagtatat
         1861 cggcatagta taatacgaca aggtgaggaa ctaaaccatg gccaagttga ccagtgccgt
         1921 tccggtgctc accgcgcgcg acgtcgccgg agcggtcgag ttctggaccg accggctcgg
         1981 gttctcccgg gacttcgtgg aggacgactt cgccggtgtg gtccgggacg acgtgaccct
         2041 gttcatcagc gcggtccagg accaggtggt gccggacaac accctggcct gggtgtgggt
         2101 gcgcggcctg gacgagctgt acgccgagtg gtcggaggtc gtgtccacga acttccggga
         2161 cgcctccggg ccggccatga ccgagatcgg cgagcagccg tgggggcggg agttcgccct
         2221 gcgcgacccg gccggcaact gcgtgcactt cgtggccgag gagcaggact gacacgtccg
         2281 acggcggccc acgggtccca ggcctcggag atccgtcccc cttttccttt gtcgatatca
         2341 tgtaattagt tatgtcacgc ttacattcac gccctccccc cacatccgct ctaaccgaaa
         2401 aggaaggagt tagacaacct gaagtctagg tccctattta tttttttata gttatgttag
         2461 tattaagaac gttatttata tttcaaattt ttcttttttt tctgtacaga cgcgtgtacg
         2521 catgtaacat tatactgaaa accttgcttg agaaggtttt gggacgctcg aaggctttaa
         2581 tttgcaagct ggagaccaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa
         2641 aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc
         2701 gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag gcgtttcccc
         2761 ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg
         2821 cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcaatgctc acgctgtagg tatctcagtt
         2881 cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc
         2941 gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc
         3001 cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag
         3061 agttcttgaa gtggtggcct aactacggct acactagaag gacagtattt ggtatctgcg
         3121 ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa
         3181 ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag
         3241 gatctcaaga agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg aacgaaaact
         3301 cacgttaagg gattttggtc atgagatc

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