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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pSH47
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
基本信息
| 质粒类型: | 酵母基因敲除载体 |
|---|---|
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | GAL |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 6979 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | M13-F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
| 3' 测序引物及序列: | M13-R:CAGGAAACAGCTATGAC |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | URA3 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY2219 | pSH47 | 5ug质粒 |
¥1500.00 |
质粒图谱
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文献和实验序列中的方向。为了清楚,质粒图谱的其余部分未列。 2.2. rAAV载体产生和滴定 对于小规模的包装实验,8´105 293细胞在35mm6孔盘上种植。24小时后,根据生产商的方法用lipofectamin(Life Technologies)一式三份转染培养物。对于开始的优化实验,所用的载体对辅助质粒的比例在表1列出。根据载体和辅助质粒的大小,1mg:3mg比例相应于1:1的pTR-UF5对pSH3/5的摩尔比。pAAV/Ad质粒与Ad共感染,3或5mg的pAAV/Ad与1mg的pTR-UF
摘要: 腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒,目前因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。构建重组AAV(rAAV)涉及到用一个目的基因替换病毒基因组的大部分,然后将这个重组基因组包装到一个有感染性的病毒颗粒里。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。此方法的局限性包括(1) Ad辅助病毒污染rAAV,(2)rAAV的低产出,(3)生成有复制能力的AAV
问:刚做克隆,遇见测序过程中 有3'端测序,5'端测序,到底是怎么回事?为什么有两个测序结果?我应该按那一个来看测序正确还是不正确?答:测序都是从5'端进行的,正向和反向测序是指对DNA的两条互补链分别测序,通常两个方向测序结果经校读后完全一致才能认为得到可靠结果。一点测序经验:1、测序选择引物很重要,一般的克隆载体现在都有通用引物,如T7,SP6,M13-47, RVM, ....但选择哪个引物测序呢?我们实验室经常测序,实践证明,引物在载体中所在位置最好是目的片段起始点上游100bp左右
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