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- 泽叶生物
- 中国/美国
- 3469ZYP387Hu01
- 2025年07月14日
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-20℃
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6-12months
- 英文名：
Recombinant Charcot Leyden Crystal Protein (CLC)
- 库存：
大量
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学，重组蛋白，细胞因子，抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞，因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇，使免疫组化标记敏感性明显降低，因此在染色前，有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时，浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要，有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要，同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强，但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效，而对固定很长时间旧的存档组织，酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性，但经福尔马林固定的蛋白质，温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示，温度为92-98℃是合适的，95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律，否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后，取出放于室温中让其慢慢地降温，绝对不能为了争取时间，强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结，要有一个自然环境让其自然放松下来，随着温度的降低，它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体，一定要充足，防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时，由于它的量较大，可延缓液体的沸腾时间，增加切片受微波辐射的量，对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验域 / 折叠花样的总数是有限的。蛋白结构的模块化本质允许一级序列存在插入或删除。一般来说，结构域与功能一一对应（如 Kinase），但并不总是如此（如 TIM 桶），类似的结构可具有不同的功能 , 不同的结构可具有相似的功能。蛋白质结构与功能研究的技术路线如下：对整个技术路线，我们挑选其中的几个来讲一讲。首先就是蛋白结晶片段的选取，前面讲过，一般来说，蛋白质结构域与功能一一对应。因此，为了降低整个项目的难度（多个结构域会增加蛋白制备难度和结晶难度），通常会按照结构域选取蛋白质片段进行重组蛋白制备及结晶
质检测，例如 SPR 分析。以往为了增进目标蛋白的纯度，或进行下游分析，常常研究一个蛋白需要使用好几个不同的标签。现在有了 Strep-tag® 这个多功能的亲和标签系统，让您的蛋白研究从克隆到分析一次到位。 由于 Strep-tag® 标签蛋白的纯化在温和的条件下进行，这些靶蛋白通常被广泛的使用于： 蛋白质结构与功能研究 结晶学，鉴定蛋白质的 3D 结构 检测蛋白质-蛋白质交互作用 了解配体-受体在生理条件下的相互作用 分离活细胞、外泌体 两种 Strep 标签及配体的亲和力比较 图 3 Strep
。由于重组蛋白特性不同，纯化的高低也有差异。尽管可以通过更改纯化树脂来解决该问题，但是采用第二种纯化Tag是目前最有限的方法。尤其对于结晶学研究、免疫 和高通量分析，高纯度蛋白的获得非常重要。 适合变性或生理条件下纯化： 很难预测表达的重组蛋白是可溶性还是形成包涵体，这由启动子的强度和蛋白自身的折叠速率所决定。如果蛋白是可溶性的并具有生理功能，Strep-tag是纯化的最佳选择，因为其可以在生理条件下纯化蛋白从而保持蛋白的生物学活性。如果蛋白以包涵体形式存在，需要加入高浓度的胍
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