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内皮素转化酶1(ECE1)重组蛋白

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  • 中国/美国
  • 2025年12月16日
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    • 保质期

      6-12months

    • 英文名

      Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)

    • 库存

      大量

    • 供应商

      泽叶生物

    • 规格

      50ug/100ug/1mg

    上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。

    经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。

    抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
    1
    、pH的应用范围及选择

    抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。

    2、抗原修复时应选择最佳温度

    70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。

    3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的

    抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。

    4、尽量使用足量的抗原修复液

    应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。

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    相关实验
    • 中科院高福院士课题组 2020 年发表了哪些重要的研究成果?

      和 H4 阻断病毒的尖峰糖蛋白受体结合域(RBD)与细胞受体血管紧张素转化酶 2(ACE2)之间的结合。竞争分析表明这两种抗体在 RBD 上具有不同的表位,使其成为潜在有希望的靶向病毒的单克隆抗体对,从而避免了未来临床应用中的免疫逃逸。此外,在小鼠模型中进行的一项治疗研究证实,这些抗体可以降低感染肺部的病毒滴度。RBD-B38 复杂结构表明,表位上的大多数残基与 RBD-ACE2 结合界面重叠,从而说明了阻断作用和中和能力。研究结果突出了基于抗体的疗法的前景,并为合理疫苗设计提供了结构基础。 图源

    • 甲醇酵母细胞表达系统

      酵母中外源基因都带有指导分泌的信号肽序列,使表达的外源目的蛋白分泌到发酵液中,有利于分离纯化;(3)发酵工艺成熟,易放大。已经有大规模工业化高密度生产的发酵工艺,且细胞干重达100g/l以上,表达重组蛋白时,已成功放大到10000升;(4)培养成本低,产物易分离。毕赤酵母所用发酵培养基十分廉价,一般碳源为甘油或葡萄糖及甲醇,其余为无机盐,培养基中不含蛋白,有利于下游产品分离纯化;而酿酒酵母所用诱导物一般为价格较高的半乳糖;(5)外源蛋白基因遗传稳定。一般外源蛋白基因整合到毕赤酵母染色体上,随染色体复制

    • 二十一世纪的生物工程

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