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-20℃
- 保质期:
6-12months
- 英文名:
Recombinant Specificity Protein 1 (Sp1)
- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验极其严重的病原体。分子寄生虫学主要在分子水平上研究寄生虫的发生、发展、免疫、诊断、基因结构与功能关系、疫苗和药物机制等。甲醇酵母表达系统已经被成功地应用到寄生虫领域的研究工作中。河南省农科院畜牧研究所曾利用毕赤酵母表达系统成功地使旋毛虫肌幼虫ES抗原特异性蛋白的2个结构基因分泌 表达。他们的研究表明,在大肠杆菌和酵母菌中表达的重组蛋白都是研制旋毛虫基因组抗原的良好候选抗原蛋白,尤其是酵母菌表达的糖蛋白,在旋毛虫病的检测和免疫方面具有潜在 的开发应用价值。另外,已经有科学研究人员将毕赤
1. 介绍 人造锌指蛋白在生物医学研究和基因疗法中有重要应用,而且是生物化学和分子生物学研究的新工具 [ 1~3 ] 。特 别是(Cys)2 (His)2 型锌指模体(真核细胞中最常见的 DNA 结合模体)为新的 DNA 结合蛋白设计提供通用的、引人瞩目的框架。对某些 (Cys)2(His)2 型锌指蛋白-DNA 复合物揭示出这一模体与 DNA 结合的下列特征: (1 ) 锌指结构用一特异的连接子反复连接; ( 2 ) 每一个锌指结构结合到 DNA 的一个三碱基对位置上,以其
达到产生特异性条带的最大量,同时又将探针或目的蛋白与反映中其它物质非特异性结合减至最低。 二、DNA结合反应条件优化如下图: 在一支1.5ml EP管中加入如下成分,30度孵育30min,加入少量EMSA loading buffer。 1. 成分加样顺序:最主要是要注意DNA与蛋白只能在最后一步接触。DNA探针只能与非特异竞争性探针一起或在其之后加入。 2. 温度:一般均在30度,但有的蛋白如sp1,在20度较好。 3. 时间:一般孵育为10-30min,对于大部
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