pET-50b(+)载体

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  • ZY 71464-3
  • 2025年07月12日
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    • 保质期

      三年

    • 英文名

      pET-50b(+)

    • 库存

      20

    • 供应商

      泽叶生物

    pET50b载体基本信息

    出品公司:
    别名: pET50b, pET 50b
    质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达
    表达水平:
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 6733 bp
    5' 测序引物及序列: T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
    3' 测序引物及序列: T7t: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
    载体标签: N-Nus, N-His, N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin
    载体抗性: 卡那
    备注:
    和pET47系列载体一样,但是多出了一个N端Nus标签;载体含有HRV 3C蛋白酶切位点,可以在低温下直接将多余的融合表达标签切除。
    产品目录号: ZY71464-3
    稳定性: 瞬时表达
    组成型: 组成型
    病毒/非病毒: 非病毒

    pET50b载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pET-50b载体图谱



    pET-50b多克隆位点

    pET-50b载体特征

    pET50b载体简介

    pET50b载体携带有N端的Nus标签和His纯化标签,紧跟着这些标签的有一个HRV3C蛋白酶切位点。这个HRV3C蛋白酶切位点能够特异性的高效切割 “LEVLFQ↓GP”氨基酸序列,酶活力在低温下很强。pET-50b(+)载体上还含有一个可选择的C端Thrombin蛋白酶切位点和S标签序列。

    载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。

    T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。




    pET50b载体序列

    LOCUS       pET-50b(+)              6733 bp    DNA     circular     11-SEP-2008
    DEFINITION  pET-50b(+).
    SOURCE      
      ORGANISM  
    COMMENT     This file is created by Vector NTI
                http://www.biofeng.com/
    COMMENT     ORIGDB|GenBank
    COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    COMMENT     VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
    COMMENT     VNTREPLTYPE|Plasmid
    COMMENT     VNTEXTCHREPL|Bacteria
    FEATURES             Location/Qualifiers
         rep_origin      complement(6274..6721)
                         /vntifkey="33"
                         /label=f1\ori
         misc_RNA        complement(4650..5205)
                         /vntifkey="53"
                         /label=RNA\II
         rep_origin      complement(4650..4650)
                         /vntifkey="33"
                         /label=ColE1,\pBR\ori
         misc_RNA        5090..5197
                         /vntifkey="53"
                         /label=RNA\I
         CDS             4028..4219
                         /vntifkey="4"
                         /label=ROP\gene
         CDS             2374..3456
                         /vntifkey="4"
                         /label=lacI
                         /note="lac repressor"
         promoter        complement(1967..1983)
                         /vntifkey="30"
                         /label=T7\promoter
         protein_bind    complement(1942..1962)
                         /vntifkey="31"
                         /label=lacO
         protein_bind    complement(342..359)
                         /vntifkey="31"
                         /label=His-Tag
         terminator      complement(26..73)
                         /vntifkey="43"
                         /label=T7\terminator
         CDS             5359..6174
                         /vntifkey="4"
                         /label=Kan
         misc_feature    complement(213..230)
                         /vntifkey="21"
                         /label=Thrombin\site
         protein_bind    complement(168..212)
                         /vntifkey="31"
                         /label=S-Tag
         misc_binding    complement(1866..1883)
                         /vntifkey="20"
                         /label=His-Tag
         CDS             complement(375..1859)
                         /vntifkey="4"
                         /label=Nus-Tag
         protein_bind    complement(310..332)
                         /vntifkey="31"
                         /label=3c
         primer          complement(300..336)
                         /vntifkey="27"
                         /label=S-SacII/Bam\+SanDI\-dcm
    BASE COUNT     1584 a      1768 c      1759 g      1622 t
    ORIGIN
            1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
           61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
          121 tgtttagcag cctaggttaa ttaagcctcg agagcagcag aagtagagct gtccatgtgc
          181 tggcgttcga atttagcagc agcggtttct ttactaccgc gtggcaccag agcgagctct
          241 gcggccgcaa gcttgtcgac ggacgtcggg cgcgccaagg cctgtacaga attcggatcc
          301 tggtacccgg gtccctgaaa gaggacttca agagccgcgg agtgatggtg atggtgatga
          361 ccagaaccac tagtcgcttc gtcaccgaac cagcaaatat tacgggcagc cataatcagt
          421 gctccggctt tttcgtcggt caacccttcg atatcagcca gatcatcaat gccctgttcg
          481 gcgagatctt ccagcgtaca aacgccacgg gcggccagtt tgaatgccaa atcacgatct
          541 accccttcaa ggttcagcag atcgtcagcc ggtttgttat caccgaggct ttcttcctgg
          601 gcctgtgcaa tggtggccag tgcattttta gcacgctcgc gcagtgcttc aacggtcggc
          661 tcatcaaggc cttcgatttc caacagctct ttcatcggca cataggccaa ttcttccagc
          721 gtcgagaagc cttcttctac cagaacagtc gcgaagtctt cgtcgatgtc gagatatttg
          781 gtgaaggtgt cgatcgctgc gtgcgcttcc gcctgatgct tagcttgcag gtcgtcaacg
          841 gtcatcacgt tgagttccca accgctcagt tgcgaagcca gacgcacgtt ctgaccgtta
          901 cggccaatcg cctgcgccag attaccggct tcaacggcga tgtccatggt gtgtttatct
          961 tcatccacca cgatagaagc aacgtctgcc ggtgccattg cgttaatcac gaactgcgcc
         1021 gggttatcat cccacaggac gatatcgata cgctcgccac ccagttcagt agacaccgcc
         1081 tgaacacgcg cgccacgcat acctacgcaa gcacctaccg gatcgatacg tttatcgttg
         1141 gttttcaccg cgattttcgc acgagaaccc ggatcgcgag ccgctgcttt aatttcaatc
         1201 acttcttcgc cgatttctgg cacttcaata cggaacagtt cgatcagcat ttccggcttg
         1261 gaacgagtga cgaacagttg cgcgccacgc gcttccgggc gaacggaata gagcacgcca
         1321 cgaacgcggt cgccagggcg gaagttttca cgcggcagca tatcttcgcg caggatcacg
         1381 gcttcagcgt tgttgcccag atccagagag atgttgtcgc ggtttacttt tttcaccacg
         1441 ccggtgatga tttcaccttc gtgttcacgg aactgatcaa ccaccatcgc acgttcggct
         1501 tcacgcactt tctgcacgat aacctgtttt gccgtctggg tagtgatacg gtcaaaggta
         1561 acagactcaa tctgatcttc aacgtaatcg cccaggttca ggctttcatc ttcataacgt
         1621 gcggcttcaa gggtgatttc cttggtcggc tgggtgactt catcaacaac taaccagcga
         1681 cggaaagtgt caaaatcacc gcttttgcga tcgatctgta cgcggacgtc gatctcttgt
         1741 tcatattttt tctttgttgc tgtcgccagc gcgctttcca atgcttcgaa aatcttctcg
         1801 cgaggtagcg ccttttcatt ggatacggct tcaactacag ccaaaatttc tttgttcata
         1861 ctagaatggt gatggtggtg atggctgctg cccatatgta tatctccttc ttaaagttaa
         1921 acaaaattat ttctagaggg gaattgttat ccgctcacaa ttcccctata gtgagtcgta
         1981 ttaatttcgc gggatcgaga tcgatctcga tcctctacgc cggacgcatc gtggccggca
         2041 tcaccggcgc cacaggtgcg gttgctggcg cctatatcgc cgacatcacc gatggggaag
         2101 atcgggctcg ccacttcggg ctcatgagcg cttgtttcgg cgtgggtatg gtggcaggcc
         2161 ccgtggccgg gggactgttg ggcgccatct ccttgcatgc accattcctt gcggcggcgg
         2221 tgctcaacgg cctcaaccta ctactgggct gcttcctaat gcaggagtcg cataagggag
         2281 agcgtcgaga tcccggacac catcgaatgg cgcaaaacct ttcgcggtat ggcatgatag
         2341 cgcccggaag agagtcaatt cagggtggtg aatgtgaaac cagtaacgtt atacgatgtc
         2401 gcagagtatg ccggtgtctc ttatcagacc gtttcccgcg tggtgaacca ggccagccac
         2461 gtttctgcga aaacgcggga aaaagtggaa gcggcgatgg cggagctgaa ttacattccc
         2521 aaccgcgtgg cacaacaact ggcgggcaaa cagtcgttgc tgattggcgt tgccacctcc
         2581 agtctggccc tgcacgcgcc gtcgcaaatt gtcgcggcga ttaaatctcg cgccgatcaa
         2641 ctgggtgcca gcgtggtggt gtcgatggta gaacgaagcg gcgtcgaagc ctgtaaagcg
         2701 gcggtgcaca atcttctcgc gcaacgcgtc agtgggctga tcattaacta tccgctggat
         2761 gaccaggatg ccattgctgt ggaagctgcc tgcactaatg ttccggcgtt atttcttgat
         2821 gtctctgacc agacacccat caacagtatt attttctccc atgaagacgg tacgcgactg
         2881 ggcgtggagc atctggtcgc attgggtcac cagcaaatcg cgctgttagc gggcccatta
         2941 agttctgtct cggcgcgtct gcgtctggct ggctggcata aatatctcac tcgcaatcaa
         3001 attcagccga tagcggaacg ggaaggcgac tggagtgcca tgtccggttt tcaacaaacc
         3061 atgcaaatgc tgaatgaggg catcgttccc actgcgatgc tggttgccaa cgatcagatg
         3121 gcgctgggcg caatgcgcgc cattaccgag tccgggctgc gcgttggtgc ggacatctcg
         3181 gtagtgggat acgacgatac cgaagacagc tcatgttata tcccgccgtt aaccaccatc
         3241 aaacaggatt ttcgcctgct ggggcaaacc agcgtggacc gcttgctgca actctctcag
         3301 ggccaggcgg tgaagggcaa tcagctgttg cccgtctcac tggtgaaaag aaaaaccacc
         3361 ctggcgccca atacgcaaac cgcctctccc cgcgcgttgg ccgattcatt aatgcagctg
         3421 gcacgacagg tttcccgact ggaaagcggg cagtgagcgc aacgcaatta atgtaagtta
         3481 gctcactcat taggcaccgg gatctcgacc gatgcccttg agagccttca acccagtcag
         3541 ctccttccgg tgggcgcggg gcatgactag catgatcgtg ctcctgtcgt tgaggacccg
         3601 gctaggctgg cggggttgcc ttactggtta gcagaatgaa tcaccgatac gcgagcgaac
         3661 gtgaagcgac tgctgctgca aaacgtctgc gacctgagca acaacatgaa tggtcttcgg
         3721 tttccgtgtt tcgtaaagtc tggaaacgcg gaagtcagcg ccctgcacca ttatgttccg
         3781 gatctgcatc gcaggatgct gctggctacc ctgtggaaca cctacatctg tattaacgaa
         3841 gcgctggcat tgaccctgag tgatttttct ctggtcccgc cgcatccata ccgccagttg
         3901 tttaccctca caacgttcca gtaaccgggc atgttcatca tcagtaaccc gtatcgtgag
         3961 catcctctct cgtttcatcg gtatcattac ccccatgaac agaaatcccc cttacacgga
         4021 ggcatcagtg accaaacagg aaaaaaccgc ccttaacatg gcccgcttta tcagaagcca
         4081 gacattaacg cttctggaga aactcaacga gctggacgcg gatgaacagg cagacatctg
         4141 tgaatcgctt cacgaccacg ctgatgagct ttaccgcagc tgcctcgcgc gtttcggtga
         4201 tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc
         4261 ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg
         4321 cgcagccatg acccagtcac gtagcgatag cggagtgtat actggcttaa ctatgcggca
         4381 tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg
         4441 taaggagaaa ataccgcatc aggcgctctt ccgcttcctc gctcactgac tcgctgcgct
         4501 cggtcgttcg gctgcggcga gcggtatcag ctcactcaaa ggcggtaata cggttatcca
         4561 cagaatcagg ggataacgca ggaaagaaca tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga
         4621 accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt tccataggct ccgcccccct gacgagcatc
         4681 acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc gaaacccgac aggactataa agataccagg
         4741 cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat
         4801 acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt
         4861 atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc
         4921 agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg
         4981 acttatcgcc actggcagca gccactggta acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg
         5041 gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta actacggcta cactagaagg acagtatttg
         5101 gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg
         5161 gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt tttttgtttg caagcagcag attacgcgca
         5221 gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga
         5281 acgaaaactc acgttaaggg attttggtca tgaacaataa aactgtctgc ttacataaac
         5341 agtaatacaa ggggtgttat gagccatatt caacgggaaa cgtcttgctc taggccgcga
         5401 ttaaattcca acatggatgc tgatttatat gggtataaat gggctcgcga taatgtcggg
         5461 caatcaggtg cgacaatcta tcgattgtat gggaagcccg atgcgccaga gttgtttctg
         5521 aaacatggca aaggtagcgt tgccaatgat gttacagatg agatggtcag actaaactgg
         5581 ctgacggaat ttatgcctct tccgaccatc aagcatttta tccgtactcc tgatgatgca
         5641 tggttactca ccactgcgat ccccggcaaa acagcattcc aggtattaga agaatatcct
         5701 gattcaggtg aaaatattgt tgatgcgctg gcagtgttcc tgcgccggtt gcattcgatt
         5761 cctgtttgta attgtccttt taacagtgat cgcgtatttc gtctcgctca ggcgcaatca
         5821 cgaatgaata acggtttggt tgatgcgagt gattttgatg acgagcgtaa tggctggcct
         5881 gttgaacaag tctggaaaga aatgcataaa cttttgccat tctcaccgga ttcagtcgtc
         5941 actcatggtg atttctcact tgataacctt atttttgacg aggggaaatt aataggttgt
         6001 attgatgttg gacgagtcgg aatcgcagac cgataccagg atcttgccat cctatggaac
         6061 tgcctcggtg agttttctcc ttcattacag aaacggcttt ttcaaaaata tggtattgat
         6121 aatcctgata tgaataaatt gcagtttcat ttgatgctcg atgagttttt ctaagaatta
         6181 attcatgagc ggatacatat ttgaatgtat ttagaaaaat aaacaaatag gggttccgcg
         6241 cacatttccc cgaaaagtgc cacctgaaat tgtaaacgtt aatattttgt taaaattcgc
         6301 gttaaatttt tgttaaatca gctcattttt taaccaatag gccgaaatcg gcaaaatccc
         6361 ttataaatca aaagaataga ccgagatagg gttgagtgtt gttccagttt ggaacaagag
         6421 tccactatta aagaacgtgg actccaacgt caaagggcga aaaaccgtct atcagggcga
         6481 tggcccacta cgtgaaccat caccctaatc aagttttttg gggtcgaggt gccgtaaagc
         6541 actaaatcgg aaccctaaag ggagcccccg atttagagct tgacggggaa agccggcgaa
         6601 cgtggcgaga aaggaaggga agaaagcgaa aggagcgggc gctagggcgc tggcaagtgt
         6661 agcggtcacg ctgcgcgtaa ccaccacacc cgccgcgctt aatgcgccgc tacagggcgc
         6721 gtcccattcg cca

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