产品特点:
1.离心柱法;
2.高质量:提取的DNA纯度高,可直接用于下游实验;
3.方便:采用离心柱法,操作简单、快捷。
产品介绍:
产品名称:口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
货号/规格:KR008J/50次
本试剂盒用于提取口腔拭子样本的基因组DNA,每个口腔拭子DNA得率为1-4μg,OD260/OD280的范围通常在1.7至1.9之间。
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取组织中的DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,高效、专一吸附DNA, 可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大、纯度高,质量稳定可靠,可直接应用于PCR、Q-PCR、酶切、文库构建、Southern杂交等下游实验。
使用说明:
【产品内容】
货号 |
产品组成 |
规格 |
保存条件 |
KR008J (50次) |
缓冲液AKB |
22 mL |
室温 |
KR008J (50次) |
洗涤液CWB1 |
12 mL |
室温 |
KR008J (50次) |
洗涤液WB2 |
14 mL |
室温 |
KR008J (50次) |
无核酸酶污染纯水 |
6 mL |
室温 |
KR008J (50次) |
DNA吸附柱 |
50支 |
室温 |
KR008J (50次) |
收集管2-mL |
50支 |
室温 |
KR008J (50次) |
无核酸酶污染 离心管1.5-mL |
50支 |
室温 |
KR008J (50次) |
Proteinase K |
1 mL |
-20℃ |
*已充分考虑到每次吸取试剂时的损耗,试剂有效期为12个月。
【使用前注意事项】
1.试剂盒中部分试剂需低温储存,请及时置于指定温度储存。
2.第一次使用前应在洗涤液CWB1中加入18 mL无水乙醇。
3.第一次使用前应在洗涤液WB2中加入42 mL无水乙醇。
4.需自备若干无核酸酶污染的离心管,本试剂盒提供的50支无核酸酶污染的离心管仅用于收集最终提取的DNA溶液。
【操作步骤】
1.样品处理
将在面颊内擦拭过的口腔拭子置于2mL离心管中,用剪刀将棉签部分从杆上剪下,加入400μL 缓冲液AKB和20 μL的Proteinase K,涡旋振荡10s混匀。
2.将离心管置于56 ℃保温30min。
3.保温结束后涡旋振荡10s混匀,取出拭子(尽量在管壁上挤压)。
4.加入400 μL无水乙醇,涡旋振荡10s混匀。
5.将DNA吸附柱置于2-mL收集管中,将上述溶液全部转移到DNA吸附柱中,13,000 rpm离心1 min,弃滤液。
6.将吸附柱重新放回2- mL收集管中,加入500 μL洗涤液CWB1,室温离心13,000 rpm,1 min,弃废液。
注意:初次使用前需向洗涤液CWB1瓶中加入18 mL的无水乙醇,并充分振荡混匀。
7.将DNA吸附柱重新放回2 -mL收集管中,加入500 μL洗涤液WB2,13,000 rpm离心1 min,弃废液。
注意:初次使用前需向洗涤液WB2瓶中加入42 mL的无水乙醇,并充分振荡混匀。
8.重复步骤7一次。
9.将DNA吸附柱置于新的1.5-mL无核酸酶污染的离心管中,开盖于室温静置或超净工作台风干3-5 min,以彻底挥发残余的乙醇。
注意:残留的乙醇可能会影响后续的PCR等实验。
10.向吸附柱柱膜中央上方小心加入20-50 μL无核酸酶污染纯水(此步骤请谨慎操作,枪头请勿接触柱膜,纯水经65 ℃温浴后再加入有助于提高洗脱效率),室温静置3-5 min,13,000 rpm 离心1 min。洗脱液即为DNA溶液。
注意:需长期保存DNA时建议用TE缓冲液(10mM Tris-HCl,1mM EDTA pH8.0)洗脱。