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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 细胞类型:
科研
- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
25T
细胞常规说明:
培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
悬浮细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)
3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀
2.吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿
3.分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基,使细胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培养基PH值变化情况和细胞密度,定期半量换液(每周2-3次),待细胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重复1项操作或者冻存
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜完全培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存
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文献和实验或者不把其作为结果放上去,所以也无从参考。 然后作用时间的话,24h应该够了吧? 有战友做过类似实验的吗?可否介绍一下你们的实验方法。谢谢! chp_cn 我觉得没必要做MTT,因为这些信号通路都是比较基本的通路。一旦被阻断,细胞代谢必然受影响。而不被阻断,则没有达到阻断的目的。所以做MTT没有任何意义。 有的文献会提到这些抑制剂的浓度,不过具体到你的实验,取决于你的细胞,不同细胞中相应的信号通路强弱不一。但范围一般在1um
dj070886 从CST新买了一支U0126,是冻干粉,而且是用CST公司那种装抗体的管子装的,没有封口,请问这种状态下的粉子是有菌的还是无菌的?求助啊,求助 chp_cn 应该是无菌的,你应该到culture hood中稀释好,分装到无菌的小管中保存。 good luck! seagate 就算有菌,拿dmso溶解为母液就可以用了,dmso号称万能
在G2/M期也是说你的药物是阻滞了细胞周期的进行,不利于细胞的增殖;跟你的凋亡结果是正相关的! chp_cn 当细胞接收到信号说现在不利于分裂,或者时机不成熟,细胞就会在细胞周期的check point停下来,进行检查。 当时机成熟时,就继续分裂。当检查发现出现无法修复的错误时,细胞就会启动凋亡程序。 The G2-M DNA damage checkpoint is an important cell cycle
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