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分子生物学技术
真核细胞DNA的制备与定量|质粒DNA的碱裂解法提取与纯化|λ噬菌体DNA提取|DNA分子的限制性 内切酶消化|DNA片段回收与纯化|目的基因的亚克隆|PCR|引物参数计算|PCR产物的克隆|DNA序列测 定|Southern 杂交|PCR-SSCP|细胞凋亡|RNA操作中的一般要求|RNA的制备|mRNA的分离与纯化|RT-PCR|Northern Blot|RPA|ddPCR|原位杂交|原核表达|蛋白SDS电泳|Western|表达蛋白的分离与纯化|表达 蛋白的生物学活性的检测|真核转染
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文献和实验bluesky0902 请教各位:为什么条带这么不清晰呢?而Marker还可以,是电泳的问题,胶的问题还是染色的问题呢?刚开始做,是在搞不明白~·电泳是非变性聚丙烯,染色步骤如下: 染色步骤: 1. 固定液:100%冰醋酸2ml,无水乙醇40ml加水至400ml,摇7-8min 2. 银染液:0.6g硝酸银加水至300ml,摇12-15min 3. 加水洗1-2次,每次1min
[目的与原理] 掌握一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的方法,并用此法进一步分析血清蛋白的组成。1、聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺是由丙烯酰胺(Acr)、NN′-甲叉双丙烯酰胺(Bis),在催化剂过硫酸铵[ammonium persulfate (NH4)2S2O8 简称AP)或核黄素(ribofavin 即vitaminB2,C17H20O6N4)和加速剂N,N, N′,N′-四甲基乙二胺(N,N,N′,N′-ytetramethyl ethyenediamine,简称TEMEM)的作用下,聚合而成
一. 实验原理SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后,电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量。二. 试剂和器材试剂:1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH
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