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- 库存:
99
- 细胞类型:
科研
- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
25T
细胞常规说明:
培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
悬浮细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)
3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀
2.吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿
3.分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基,使细胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培养基PH值变化情况和细胞密度,定期半量换液(每周2-3次),待细胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重复1项操作或者冻存
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜完全培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存
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文献和实验Sci Adv:中山大学柳夏林团队发现可有效治疗 GVHD 相关性干眼的新疗法
了巨噬细胞向抑炎的 M2 表型转化。这些结果提示,MSC-exo 可能靶向调控巨噬细胞的浸润和免疫表型,调控角膜免疫微环境进而发挥治疗作用。 接下来,研究人员通过外泌体 miRNA 测序,发现 MSC-exo 富含 miR-204。在功能获得研究中,通过在成纤维细胞过表达 miR-204 制备成 L929- miR-204-exo,发现 L929- miR-204-exo 干预干眼的效应与 MSC-exo 相当。而在功能缺失研究中,通过 antagomiR-204 阻断 MSC-exo 中 miR
L929 细胞增殖MTT比色法检测IL-1的生物活性 【基本原理】 IL-1具有刺激多种来源的成纤维细胞增殖的作用,可用于IL-1生物活性检测。目前国内外大多数实验室常用L929细胞株(小鼠成纤维细胞瘤细胞)作为检测IL-1生物活性的靶细胞或反应细胞。MTT比色法的原理是利用四甲基偶氮唑盐[3-(4.5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]在活细胞线粒体的琥珀酸脱氢酶作用
-1的浓度成直线关系。因此可以利用IL-2依赖细胞株(如CTLL2)测定IL-2,藉以间接测定IL-1的含量。 2.成纤维细胞增殖法IL-1能刺激成纤维细胞的增殖,故可利用来源于新生儿包皮或传代的人皮肤成纤维细胞(如CRL1445)测定IL-1.国内常用小鼠成纤维细胞瘤L929细胞株。 检测原则是将生长成单层的L929细胞用胰酶消化后,配成适当浓度的细胞悬液,继将不同稀释度的待测样本与L929细胞悬液分加入96孔培养液中。一式三份,并设置阴性对照,放入37℃、5%CO2的温箱中温育72h
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