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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 细胞类型:
科研
- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
25T
细胞常规说明:
培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
悬浮细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)
3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀
2.吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿
3.分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基,使细胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培养基PH值变化情况和细胞密度,定期半量换液(每周2-3次),待细胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重复1项操作或者冻存
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜完全培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存
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文献和实验丁香园网友hyong915的观点为:成纤维细胞培养(一) 原代培养1、在手术室无菌条件下,切取新鲜的皮肤,增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织,修除表皮和皮下组织,盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内,Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液,眼科剪反复剪切组织块成0.5-1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上,组织块间留约0.3-0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞,放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊,更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期,谢谢! zhujoker 估计都没人做过,你如果需要观察其生物学功能,就自己做一次,也算原创了啊! freecell 这里有: http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意
构成纤维性结缔组织的重要成分。观察组织切片,可见这些细胞具有长而扁平的外形,常有不规则的突起。细胞质内含有线粒体、高尔基体、中心体、微脂肪粒等、其他无特殊的分化。细胞核呈椭圆形,有明显的核仁,细胞核染色性差。常与胶原纤维紧密相连,因与胶原纤维的形成有关故称为成纤维细胞。对动物细胞进行培养,不管细胞取自何处组织,因常常出现外表上和上述细胞非常相似的细胞,所以不论以后是否形成原来定义的胶原纤维,习惯上都称为成纤维细胞。但是在培养中所见的所谓成纤维细胞中也有不少会继续形成原来定义
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