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文献和实验C30min(3ul?多加点没关系) 7)蛋白酶K37C30min(3ul?多加点没关系)再浓缩浓缩 8)6xloading buffer 混合根据小片段液量自己选择(6-10ul)0.5xTBE里跑电泳 注意:DNA别降解了,混匀时tip头口剪宽一些,组织要多一些。 另:你们问我如何避免样品溢出,好像溢出不多啊,一丝一缕而已,至少我的ladder跑得出来,就把胶放在电泳槽里后再加TBE吧,不至于全流出来吧,还有就是用6X的loading buffer,可能可以增加比重,这也是书上的做法。要不把胶
3.2.3 PCR program同3.1.3;使用PCR thermal cycler 4.0 胶片电泳分析 4.1 胶片 (2.0%) 置备: 将2 g agarose溶于100 ml ( 1x ) TAE buffer。 4.2 电泳液:(1x) TAE buffer(Tris-acetate/EDTA electropheresis buffer) 4.3 选择100~500 bp DNA size Marker:取100 bp ladder Marker 5 ul ( 25 ng
酶K37C30min(3ul?多加点没关系)再浓缩浓缩 8)6xloading buffer 混合根据小片段液量自己选择(6-10ul)0.5xTBE里跑电泳 注意:DNA别降解了,混匀时tip头口剪宽一些,组织要多一些。 另:你们问我如何避免样品溢出,好像溢出不多啊,一丝一缕而已,至少我的ladder跑得出来,就把胶放在电泳槽里后再加TBE吧,不至于全流出来吧,还有就是用6X的loading buffer,可能可以增加比重,这也是书上的做法。要不把胶的孔做深点?
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