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-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Intracellular pH fluorescence probe
- 库存:
982
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50微升
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应细胞内pH荧光探针(BCECF AM)供应,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:细胞内pH荧光探针(BCECF AM)供应
产地:国产|进口
规格:50微升
品牌:百奥莱博
英文名:Intracellular pH fluorescence probe
本品是最常用的检测细胞内pH的荧光探针,用于细胞内pH检测时,常用的BCECF AM的浓度为1-10μM。本BCECF AM(pH荧光探针)是配制于无水DMSO(anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为5mM。
BCECF AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。BCECF AM没有荧光,进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF,从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同,最大激发波长大致在503nm左右,最大发射波长大致在520nm左右,实际检测时推荐使用的激发波长为488nm,发射波长为535nm。BCECF在不同pH条件下的发射光谱参考下图。

BCECF AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究,也有报道用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的细胞内pH水平检测。在有细胞内pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF AM被广泛应用。
注意事项:
1. BCECF AM(pH荧光探针, 5mM)可能对人体有害,请注意适当防护。
2. 本BCECF AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
欲咨询购买细胞内pH荧光探针(BCECF AM)供应,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)
编号:YT309
英文名称:Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8
规格:100次
本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
试剂盒组分:
SOD检测缓冲液——————70ml
WST-8——————————800μl
酶溶液——————————100μl
反应启动液(40X)——————60μl
超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。
目前有多种SOD活性测定法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差,易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率达不到100%等,从而使检测的灵敏度和精确度受到影响;细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法,但细胞色素C其氧化活性高,易受样品中的还原剂干扰,另外该方法需要连续测定吸光度值,对于SOD的检测灵敏度比较低,并且不太适合大批量样本的检测。
目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图,WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。

基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO:xanthine oxidase。
WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时,最大抑制百分率可以接近100%,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。
本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时,对于检测结果仍无显著影响。
注意事项:
1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液,否则会干扰本试剂盒的检测。
3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
细胞内pH荧光探针(BCECF AM)供应关键词:BCECF AM,YT357,Intracellular pH fluorescence probe,细胞内pH荧光探针(BCECF AM)
·非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)
编号:YT053
英文名称:Non-denatured Gel Sample Loading Buffer
规格:2ml
本品是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液,本产品中不含SDS等变性试剂,但含有还原性试剂DTT,可以用于常规的非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)蛋白样品的上样。
注意事项:非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·抗氧化酶Catalase(过氧化氢酶)(触酶)
编号:YT307
英文名称: Catalase
规格:200mg
本酶可以催化过氧化氢的分解。是一种常用的天然抗氧化酶,用于研究活性氧在基因表达、细胞凋亡等过程中的作用。本Catalase纯化自牛肝,酶活力>3kU/mg蛋白。一个活力单位的Catalase,在25℃,pH7.0,过氧化氢浓度为约10mM条件下,每分钟可以催化分解1.0微摩尔过氧化氢。Catalase为冻干粉末,溶解于水。
分子量:247kD
注意事项:如果配制成溶液,分装后-20℃保存,三个月有效。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·多聚D-赖氨酸溶液
编号:YT162
英文名称:Poly-D-lysine Solution
规格:2mg
本产品为已经配制好的Poly-D-lysine溶液,并经过滤除菌处理,可以直接稀释后用于细胞或组织培养方面的实验。分子量大于70,000的多聚赖氨酸可以用于促进细胞贴壁生长,本产品可以用于促进细胞的贴壁生长。
CAS:27964-99-4
分子式:D-Lys-(D-Lys)n-D-Lys·xHBr
分子量:150,000~300,000
注意事项:
Poly-D-lysine和Poly-L-lysine都可以用于促进细胞的贴壁生长。Poly-L-lysine可以被某些细胞所消化并吸收,摄入过多的Poly-L-lysine会产生一定的细胞毒性。如果遇到Poly-L-lysine有细胞毒性的情况,可以考虑选购Poly-D-lysine。
储存条件:-20℃。
细胞内pH荧光探针(BCECF AM)供应关键词:BCECF AM,YT357,Intracellular pH fluorescence probe,细胞内pH荧光探针(BCECF AM)
PY02-406 DRBC培养基 250克
59-23-4 D-半乳糖 D(+)Galactose
BTN130643 烷基腺嘌呤DNA糖基化酶 AAG(Alkyladenine DNA Glycosylase)
癸二酸二甲酯 3-Hydroxybenzaldehyde 106-79-6
9001-75-6 Pepsin 1:10000 胃蛋白酶1:10000
BL0973 鸡外周血淋巴细胞分离液
BTN130624 9°N DNA连接酶 9°N DNA Ligase
ARB12264 大鼠肌球蛋白(MYS)含量检测 Rat myosin,mys ELISA KIT
BTN131064 细胞表面蛋白分离试剂盒 Bacterial Surface Protein Isolation Kit
ARB10236 人γ肽(Pγ)尿液中含量检测 Human Peptide γ,pγ ELISA KIT
9005-82-7 直链淀粉 Amylose
N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐 PPO 82611-88-9
BTN100834 胰蛋白酶抑制剂溶液 Aprotinin Solution
5-氟胞嘧啶 Chlorogenic acid 2022-85-7
3810-74-0 Streptomycin 硫酸链霉素
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文献和实验(一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。激光扫描共聚焦显微镜观察。 (二)SNARF-1定量比率测定pH值 1. 储存液配制 SNARF溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光
体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、SNAFL-calcein)、BCECF等,这些探针均为疏水性探针,须使用其AM形式。FITC-dextran则适用于pH范围4~6之间,如溶酶体pH的检测,该探针也不能透过质膜,但可通过细胞胞饮作用进入溶酶体,因此应选择分子量稍小的Dextran(葡聚糖)。 5. 细胞内
将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像,并可从任意角度观察,也可以借助改变照明角度来突出其特征,产生更生动逼真的三维效果。 4. 动态荧光测定 Ca2+、pH 及其它细胞内离子测定,利用ACAS能迅速对样品的点,线或二维图像扫描,测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率,使用诸如Indo-1、BCECF 、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率,能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应,以及使用双荧光探针Fluo
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