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文献和实验影印 到15cm SD/-Leu 平板上。 3)生长48-72 小时,观察菌落生长情况,每个菌落长至3-5mm,分别印至绒布上。 再从绒布上影印到15cm 2xYPD 平板上。Y190 菌(携带PGB-X 诱饵质粒)的 96 个克隆和Y187 菌(携带pACT2-小文库基因质粒)的96 个克隆一一对齐, 影印到一起,使其发生Mating。30℃培养20~24 小时。 4)Mating 完成, 再用绒布把菌落从2xYPD 平板影印至 SD/-Trp-Leu-His+30mM
:dextrose、L-arginine HCl、Difco PPLO broth (Difco 0554-17-1) horse serum、15% yeast extract solution (autoclaved)、Bacto agar、无菌有盖螺旋试管(autoclaved)、无菌培养皿﹙60x15mm﹚、L-玻棒、37℃培养箱、厌氧缸(厌氧缸长期培养易有污染,所以厌氧包应用无菌水,每次打开厌氧缸后,用70% ethanol擦拭内壁。) · 培养基制备:基本配方为Difco PPLO broth
HCl缓冲液(50mM) pH23°C 37°C 200mM Tris(ml) 100mM HCl(ml) pH23°C 37°C 200mM Tris(ml) 100mM HCl(ml) 9.10 8.95 25 5.0 8.05 7.90 25 27.5 8.92 8.78 25 7.5 7.96 7.82 25 30.0 8.74 8.60 25 10.0 7.87 7.73 25 32.5 8.62 8.48 25 12.5 7.77
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