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文献和实验Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) Assay
", OD 3/32", wall 1/32") to a 3cc syringe with a 20-gauge needle. The syringe was attached to an infusion pump (Harvard Apparatus, South Natick, MA). Injection of 400 μl FITC dextran, MW 2,000,000 (Sigma, St. Louis, MO), into the umbilical vein
3处理后，用Micromass的专用软件MasSeq直接推倒出肽段序列。Nanoflow probe进样毛细管电压为3000v。所有测定均在正离子方式下进行，用Glu-fib(sigma)的串联质谱碎片校正，质量准确度±0.2Da。中性丢失扫描：设定扫描范围400－2000，扫描方式为中性丢失扫描，寻找中性丢失49的双电荷离子。基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱仪为Bruker公司的Autoflex，将样品溶于0.1%TFA中，取1μL与饱和CCA基质上清液混合，取1μL点在Scorce384靶
, at 4oC for 1hr. 10.) Add 20-30 μl of protein A/G sepharose (50% slurry) and incubate at 4oC for 30min to 1hr. 11.) Prepare kinase buffer (50mM HEPES or Tris pH 7.4, 10mM MgCl2, 10mM MnCl2, 1mM DTT) and reaction mixture, which is 15 μM ATP, 500 μg/ml
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