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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验对细胞进行计数。通常计数7 d。为精确起见,一般每次计数3瓶细胞并取平均值。典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期,斜率较大的指教生长期,呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。以存活细胞数(万/mL)对培养时间(h或d)作图,即得生长曲线。 除使用计数法测定细胞的生长曲线外,还可用MTr比色法间接测量之。MTT比色法的主要原理是:MTr被活细胞中线粒体琥珀酸脱氢酶还原后,生成暗蓝色甲瓒,甲瓒被助溶剂溶解后,可在酶标仪上读取光吸收值(OD),在一定范围内光吸收值(OD)与活细胞数量呈线性
:(略) 基于保护基团的类别,必须使用去保护剂的组合。 例如, 当Boc和tButyl存在时,它们的Carbocation对应物能与Trp, Tyr和Met反应形成tbutyl产物。EDT是极有效的t-butyl trifluoroacetate清除剂, 但它不保护Trp。 因此,必须加水以控制烷基化。Trp的吲哚环和Tyr的OH极易与Pmc反应。水再次表现出对此反应的抑制。Trt和Mtr基团也有相似情形。较此适当组合清除剂将极大降低副反应。 tBoc和CBZ多肽合成
都能检测到。对于同一扩增子内的不同杂合体,通过曲线形状的差异也能区分开。HRM大约能分辨93%的杂合体。大部分纯合体也能通过熔解来分辨,但不是全部。大约有4%的人单碱基变异体有着相同的Tm,且图像对称。在这种情况下,可以将已知的纯合体与未知的纯合体混合,再进行分析。 Lasse Kristensen等曾为参与甲基代谢的关键基因(MTHFR、MTR和DNMT3b)开发出HRM分析,对它们进行基因分型,并在Rotor-gene 6000等仪器上进行检测4。他们认为,与基于TaqMan探针的基因分型相比
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