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文献和实验在丁香园见过很多大佬分享载体构建经验,所以我这里写的T载体构建只能算是入门级,给新手提供一点思路,有什么不足之处还希望大家多多指正。 我克隆的这个片段大小是1.8kb,用的是TaKaRa的LA-Taq酶做的PCR。 反应体系:5*buffer 5 ul MgCl2 5 ul dNTPs 8 ul Primer 1 1 ul Primer 2 1 ul LA-Taq 0.5 ul cDNA 1 ul (1ug左右基因组DNA) ddH2O up to 50 ul
The OP9-DL1 System: Generation of T-Lymphocytes from Embryonic or Hematopoietic Stem Cells In Vitro
will be transferred onto OP9-DL1 cells at day 8 to induce T-lineage differentiation ( Fig. 2 ). See Troubleshooting. Day 3: Medium Change 31. Remove the old medium, replace it with 10 mL of OP9 medium, and return cells to the incubator.
、 阳性对照 2 孔、空白对照 1 孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl 。然后在 待测样品孔先加样品稀释液 50 μl ,然后再加待测样品 10 μl 。 加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀, 3. 温育:用封板膜封板后置 37 ℃温育3 0 分钟。 4. 配液:将 30 ( 48T
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