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- 2025年07月03日
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上海希言科学仪器有限公司
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,1M NaCl,pH 8.0 Elution Buffer: 50mM 柠檬酸，pH 3.0 应该没有问题,如果挂得不好,你可以把Binding Buffer中的1M NaCl去掉,不知道你用什么活化的载体,如果是CNBr,那就得加,但是我们发现有时候盐也可以洗脱下来东西,你试试再说吧. 洗脱你可以用pH 5.0 4.0 3都试试,如果在高一点就可以洗下来,没有必要用太低的,怕对活性有影响 13) 这段在用离子交换柱纯化蛋白，我想问一下，洗脱采用的离子强度的大小范围，应该如何确定
而言还是尽量在柱后复性，因为这样好放大，而且容易操作，对于HPLC的柱子很容易因为沉淀而堵柱子，包括很高的变性剂对机器也不好，也可能因为流速慢而结晶堵住管道等，很复杂，虽然有一些这样的例子，但是我觉得真正操作还是麻烦，何况这样做的量也不大。所以还是选择纯化后复性吧。 12）我想问问：我把小分子偶连到填料上纯化其兔多抗，用什么结合缓冲液和洗脱缓冲液好？ 我现在拟的是： Binding Buffer： 20mM Tris，1M NaCl，pH 8.0 Elution Buffer： 50mM
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