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鹿森生物
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主营品牌:Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等
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文献和实验Genomic DNA Mini Kit 人或动物组织及培养细胞的基因组DNA提取试剂盒 29、QuickSpin BactoGenomic DNA Mini Kit(细菌基因组DNA提取试剂盒) 30、QuickSpin YeastoGenomic DNA Mini Kit(酵母基因组DNA提取试剂盒) 31、QuickSpin Plant Genomic DNA Mini Kit(植物及丝状真菌基因组DNA提取试剂盒) 31、QuickSpin Plasmid Miniprep Kit(质粒
℃消化3~5min 。期间不断在镜下观察。当细胞变圆接近脱壁时,弃消化液。3)、加入一定量的培养液(如果这些培养细胞不再有用,可加PBS),用吸管吹打,使细胞脱壁而制成细胞悬液。2、计数与计算过程1)、在细胞计数板中央放置计数专用的盖玻片。2)、用玻璃虹吸管吸取细胞,让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹蹧处流出悬液,至盖玻片被液体充满为止。3)、置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。对于压线的细胞只计数在上线和左线者,对于细胞团按单个细胞计数。4)、按下式计数细胞悬液的密度:细胞密度=(4个大格
的缓冲液再清洗一次。 2. 消化分离 消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞,以利于进一步的培养,常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。 3. 培养 细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为(2~5)×105 cells/ml,或实验所需密度,分装于培养瓶中,使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内,5%CO2,37℃静置培养。一般3~5d,原代培养细胞可以黏附于瓶壁,并伸展开始生长,可补加原培养液量1/2的新培养液,继续培养2~3d后换液
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